Construcción de un biosensor usando Rhodococcus sp. Como una fuente de colesterol oxidasa

ELOY SALINAS; VALERIA RIVERO; ANGEL A. J. TORRIERO; DELIA BENNUZI; FRANCO A. BERTOLINO; MARÍA I. SANZ; JULIO RABA

Villa de Merlo, San Luis

Congreso; III Congreso Argentino de Química Analítica; 2005

Universidad Nacional de San Luis

Rhodococcus sp. fue utilizado para inducir la producción de colesterol oxidasa en un medio rico en colesterol (medio de Gys). La biomasa resultante, con alta actividad enzimática, fue inmovilizada sobre un disco rotatorio. Cuando se introduce una muestra en el sensor enzimático colesterol oxidasa, contenida en la biomasa, genera como producto de reacción peróxido de hidrógeno; el cual difunde al medio. La presencia de HRP, co-inmovilizada con un complejo polimérico de osmio como mediador [Os(bpy)2Cl(pyCH2-)] (Os-PAA), cataliza la oxidación de Os-PAA. La reducción electroquímica de este mediador se lleva a cabo sobre la superficie de un electrodo de carbono vítreo, aplicando un potencial de 0.00V vs. Ag/AgCl, 3.0 M NaCl. La corriente catalítica generada, es proporcional a la concentración de peróxido de hidrógeno generado en el medio; el cual a su vez es directamente proporcional a la concentración total de colesterol presente en la muestra. Los datos obtenidos con este reactor enzimático fueron comparados con los obtenidos con la fijación de colesterol oxidasa sobre la superficie del disco rotatorio. Además, se evaluó el uso de Triton X-100 como sensibilizador de la pared celular del microorganismo. Los resultados de este trabajo resultan en un atractivo y económico modo de implementar esta cepa bacterana como fuente de obtención de colesterol oxidase.