La hipoxia intratumoral como modulador de la resistencia a la terapia fotodinámica

LAMBERTI, MARÍA JULIA; PANSA, MARÍA FLORENCIA; RUMIE VITTAR, NATALIA BELÉN; RIVAROLA, VIVIANA ALICIA

Mar del Plata

Congreso; LVIII reunión científica anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC).; 2013

SAIC, SAFE, SAFIS

La resistencia a intervenciones terapéuticas convencionales, observada en tumores sólidos se atribuye en gran medida a su desarrollo dentro de un microambiente hipóxico. El O es un factor determinante de la citotoxicidad de la terapia fotodinámica (TFD), tratamiento que consiste en la aplicación de un compuesto fotoactivable. Por ello, este trabajo se enfocó en caracterizar el efecto de la hipoxia intratumoral en relación a la resistencia a la TFD utilizando Me-ALA como precursor del fotosensibilizador (FS) PpIX. Para imitar microtumores avasculares se estandarizaron modelos de cultivos tridimensionales (3D) de células de carcinoma colorrectal SW480. Los cultivos 3D resultaron ser 3 veces más resistentes a la TFD en comparación con los cultivos 2D. La eficiencia terapéutica se incrementó prolongando el tiempo deincubación ?células-FS? para lograr una distribución homogénea de PpIX dentro del esferoide. Por medio de ensayos de viabilidad se observó que la periferia del esferoide fue la región más afectada por la TFD y el centro la zona con mayor supervivencia. Debido a que la respuesta molecular frente a la hipoxia es dirigida por el factor de transcripción HIF-1, se utilizó un gen reportero que demostró su actividad en el interior de la estructura 3D correspondiendo a la zona hipóxica del microtumor. Esta observación explicaría en parte la fotorresistencia observada. Para confirmar la implicancia de la hipoxia intratumoral en este fenotipo resistente, se aplicó CoCl (mimético químico de hipoxia) a cultivos 2D (no hipóxicos) previo a la TFD. Se demostró que la presencia de CoCl2 estabilizó la expresión de HIF-1 y esto se correlacionó con una disminución de la sensibilidad a la TFD. Los resultados sugieren que la resistencia a la TFD inducida por el microambiente hipóxico debe ser tenida en cuenta en el diseño de protocolos terapéuticos. Proponemos identificar marcadores moleculares y/o celularesclaves para contrarrestar la fotorresistencia tumoral.