OPTIMIZACIÓN DE LAS CONDICIONES DE CULTIVO PARA LA GENERACIÓN Y CRECIMIENTO DE RAÍCES TRANSFORMADAS DE MANÍ (ARACHIS HYPOGAEA)

GAZALEZ G, VEZZA ME, WEVAR OLLER AL, PAULUCCI NS

Córdoba

Congreso; XXVI Jornadas Científicas Sociedad de Biología de Córdoba; 2023

SOCIEDAD DE BIOLOGÍA DE CÓRDOBA

El cultivo de maní (Arachis hypogaea) se extiende en el centro-sur de Córdoba (Argentina), con alto impacto económico y social en la provincia. El manejo de plagas en este cultivo se realiza principalmente utilizando productos químicos sintéticos, con efectos negativos sobre la salud humana y ambiental, por lo que el desarrollo de biopesticidas es una necesidad emergente. Los metabolitos secundarios de origen vegetal son una buena alternativa para la generación de biopesticidas, sin embargo, estos compuestos son sintetizados a muy bajas concentraciones por las plantas. En este sentido, la utilización de raíces transformadas (RT) podría constituir una estrategia biotecnológica promisoria para aumentar su producción. Para ello, en el presente trabajo se propuso evaluar el efecto de dos medios de cultivo sobre la inducción y crecimiento temprano de RT utilizando distintos órganos de la planta como explanto. A partir de cultivos in vitro y asépticos de plantas de maní, se aislaron secciones de tallos, cotiledones y hojas que fueron infectados con la bacteria Agrobacterium rhizogenes LBA 9402 y co-cultivados durante 48 h en medio agar-agua. Posteriormente, los explantos fueron transferidos a diferentes medios de cultivo: Murashige y Skoog diluido a la mitad (½ MS) y Hoagland, suplementados con sacarosa 1,5% p/v y ampicilina 1g/L. El ensayo se realizó hasta 31 días posteriores a la fecha de aparición de la primera RT. Se registró el tiempo entre la infección y la aparición de RT, el número y la longitud de cada RT; además se calculó el porcentaje de inducción en base al número total de explantos infectados. Las primeras raíces emergieron a los 17 días post-infección en los dos medios de cultivo ensayados. El porcentaje de inducción de RT fue mayor en los explantos cultivados en medio Hoagland, siendo de 80% para cotiledón y 52,2% para hoja, mientras que los valores obtenidos utilizando medio ½ MS fueron de 7,1% y 25,8% para cotiledón y hoja, respectivamente. En tallo no se observó desarrollo de RT en los sitios de infección, indistintamente del medio de cultivo. Por otra parte, se obtuvo un mayor número de RT a partir de hoja cultivada en Hoagland, seguido por hoja en medio de cultivo ½ MS y luego los cotiledones en medio Hoagland. Respecto a la longitud de las RT, las provenientes de explantos de hoja y cotiledón cultivados en Hoagland alcanzaron mayor longitud, seguido por los explantos de hoja y cotiledón en ½ MS. Estos resultados sugieren que el medio de cultivo Hoagland podría optimizar la inducción y crecimiento temprano de RT en maní respecto al medio ½ MS habitualmente utilizado en cultivo in vitro. Mientras que en relación al tipo de órgano a utilizar como explanto, tanto hoja como cotiledón son eficaces para la generación de RT. Ensayos de establecimiento y de comprobación de la naturaleza transformada de estas raíces son necesarios a fin de definir las condiciones últimas de cultivo más apropiadas.