INVESTIGADORES
BOTTERO Daniela
congresos y reuniones científicas
Título:
11. VIGILANCIA DE LA RESISTENCIA A MACRÓLIDOS EN AISLAMIENTOS DE BORDETELLA PERTUSSIS DE ARGENTINA
Autor/es:
PIANCIOLA L; MAZZEO M.; FLORES D; NAVELLO M.; FIORI S; ZITTA; BOTTERO D.; MULLER C; HOZBOR D
Reunión:
Congreso; XIII Congreso Argentino de Microbiologia CAM 2013; 2013
Institución organizadora:
AAM
Resumen:
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Bordetella pertussis es el principal
agente etiológico de coqueluche o tos convulsa. A pesar de décadas de
vacunación, esta patología aún causa en el mundo más de 15 millones de casos
por año y alrededor de 200 000 muertes. Los macrólidos son las drogas de
elección para tratamiento y profilaxis. Desde 1994, se han informado casos de resistencia en algunos países,
especialmente Estados Unidos, Francia y China. Habitualmente no se determina la
sensibilidad de los aislamientos de B. pertussis, razón por la cual la
resistencia puede estar subestimada. El único mecanismo de resistencia descrito
hasta el momento es una mutación A/G en la posición 2047 del gen 23S rRNA.
Debido al incremento de casos en los últimos años, con el consiguiente aumento
del uso de mácrolidos, se considera importante monitorear la sensibilidad de
los aislamientos. Se estudiaron 30 cepas aisladas en el país entre 2000 y
2013. La identificación de las mismas se realizó por los métodos
microbiológicos y moleculares
recomendados por los Laboratorios Nacionales de Referencia. Para el
análisis de sensibilidad a eritromicina se utilizó la metodología descrita por
Wilson y col. (2002). Se realizó una suspensión de las colonias a partir de una
placa de Bordet-Gengou suplementado con 10% de sangre de carnero. Se ajustó el
inóculo al estándar 0.5 de Mc Farland. Con esta suspensión se hisopó una placa de
Charcoal Agar suplementado con 10% de sangre de carnero a la que se le colocó
un disco de Eritromicina de 15 ug. Las placas se incubaron durante 10 días en
atmósfera húmeda y se registraron los halos de inhibición a los 3 y 5 días. A
los 7 y 10 días las placas se examinaron cuidadosamente en búsqueda de
crecimiento de colonias dentro de los halos de inhibición. Paralelamente se
determinó la presencia de la transición A/G 2047 utilizando PCR seguida de RFLP
con la enzima BbsI (Guillot 2012) Los resultados
alcanzados nos permitieron corroborar que la aparición de cepas resistentes no
es frecuente y que se mantiene la
sensibilidad a los macrólidos en los aislamientos de B. pertussis de
nuestro país. También permiten afirmar que no es necesario realizar de rutina
pruebas de sensibilidad a todos los aislamientos. De todas formas,
merece destacarse la importancia de cultivar las muestras recibidas para
diagnóstico y derivar los aislamientos a los laboratorios de referencia para
mantener un monitoreo continuo de la evolución de la sensibilidad de este
microorganismo.