Participación de PKC epsilon, ERK1/2 y Pit-1 sobre la actividad proliferativa y biosintétiva de células lactotropas in vitro inducida por EGF

DE PAUL A.L,; GUTIÉRREZ S.; PETITI J.P.; MUKDSI J. H.; AOKI A.; TORRES A.I.

Mar del Plata

Congreso; 1ªCongreso Conjunto de Sociedades Biomédicas; 2004

SAIC

INTRODUCCIÓN: El Factor de Crecimiento Epidérmico (EGF) es sintetizado y secretado por células hipofisarias normales y tumorales estimulando la proliferación celular. Ejerce su acción a través de receptores con actividad tirosina-quinasa. Objetivo: determinar la posible participación de las enzimas PKC-epsilon y ERK1/2 y del factor de transcripción pituitario-específico (Pit-1) en el proceso proliferativo de células lactotropas por acción del EGF.MATERIALES Y MÉTODOS: Cultivos primarios adenohipofisarios de ratas hembras adultas fueron tratados durante 24h con EGF en diferentes dosis (25, 50, 100ng/ml). Se evaluó la proliferación de lactotropas por doble detección inmunocitoquímica de BrdU y prolactina (PRL). Se cuantificaron por western blot la expresión de: EGF-R, PKC-epsilon, ERK1/2-fosforilada, Pit-1 y PRL. El análisis estadístico se realizó por el test ANOVA-Tukey (p<0.05).RESULTADOS: La exposición de las células hipofisiarias a EGF durante 24h provocó un incremento significativo del EGF-R de una manera dependiente de la dosis. La expresión de las enzimas PKC epsilon, ERK 1/2 fosforilada y de la proteína Pit-1 incrementaron significativamente sus niveles respecto a los valores controles aunque no se observaron diferencias significativas entre las diferentes dosis de EGF. Un comportamiento similar se obtuvo al cuantificar los niveles de PRL donde se observó un incremento de la hormona acumulada semejante en los tres tratamientos en relación al control. Todas las dosis de EGF utilizadas aumentaron aproximadamente 7 veces la actividad mitótica de las lactotropas respecto al control (p<0.001). Los datos demuestran que las enzimas PKC epsilon y ERK1/2 formarían parte de la cascada de señales que median la proliferación de células lactotropas inducida por EGF, estimulando además la expresión de PRL. El incremento de la proteína Pit-1 sería indicativo de la participación de este factor de transcripción en estos procesos.