Efectos de Insulina y su interacción con estradiol sobre las células lactotropas: Paricipación de PKC epsilon, ERK1/2 y Pit-1

GUTIÉRREZ S.; DE PAUL A.L.; PETITI J.P.; ALVIN G.; ORGNERO E.; TORRES A.I.

Mar del Plata

Congreso; LI Reunión Anual de la SAIC; 2006

SAIC

La Insulina (Ins) promueve proliferación de las lactotropas, mientras que la coincubación con Estradiol (Es) induce efectos antimitogénicos. Los mecanismos moleculares involucrados no han sido completamente dilucidados. Objetivo: Determinar la participación de enzimas implicadas en procesos proliferativos adenohipofisarios (PKC epsilon y ERK1/2) y el factor de transcripción pituitario (Pit-1), en los efectos de Ins y Es sobre la actividad proliferativa y biosintética de lactotropas. Cultivos primarios adenohipofisarios de rata hembra fueron tratados con Ins (1-10-100ng/ml) y/o Es (1-10-100nM) por 48h. Se utilizó genisteína (Ge 25uM) y bisindolymaleimide I (BIM 0.5-2 uM), inhibidores de receptores tirosina-quinasa y de PKC respectivamente. Se valoró la proliferación de lactotropas por doble detección inmunocitoquímica de BrdU y prolactina (PRL). Se cuantificó la expresión del receptor de Ins (InsR), PKCepsilon, ERK 1/2 fosforilada, ERK total, Pit-1, PRL y beta actina por Western Blot. Análisis estadístico ANOVATukey. Ins aumentó significativamente la proliferación de lactotropas y la expresión de PKCepsilon y Pit-1. La incubación con Ge o BIM redujo el número de lactotropas marcadas con BrdU (p< 0.001). La interacción Ins/Es indujo un efecto antiproliferativo sobre las lactotropas, disminuyendo la expresión de PKCepsilon y Pit-1 (p< 0.01). Los niveles de ERK1/2 se mantuvieron invariables en todos los modelos. Ins incrementó significativamente la expresión de InsR y la coincubación Ins/Es no modificó los niveles de los mismos. La PRL intracelular aumentó un 25% con Ins (p< 0.01) y un 75% en presencia de Ins/Es (p< 0.001). Nuestros resultados evidenciaron que Ins estimuló la biosíntesis de PRL y la proliferación de lactotropas a través de mecanismos dependientes de PKC epsilon y Pit-1 e independientes de ERK1/2. La interacción Ins/Es ejerció un efecto sinérgico sobre el contenido de PRL hipofisaria y acciones antimitogénicas sobre las lactotropas en las que participaría PKCepsilon y Pit-1.