Estradiol regula la translocación nuclear de NF-kB modulando la proliferación de células lactotropas inducida por LPS a través de Toll-Like 4.

RODRIGO FANTON E. T.; GUTIÉRREZ S.; PALMERI C.; PETITI J. P.; TORRES A.I.; DE PAUL A.L.

Mar del Plata

Congreso; LIII Reunión Anual de la SAIC; 2008

SAIC

En investigaciones previas demostramos que LPS actúa sobre lactotropas de hipófisis hiperplásicas desencadenando proliferación celular. En este trabajo analizamos la participación de Toll-like 4, sus moléculas asociadas: CD14 y MyD88, en la proliferación de lactotropas inducida por LPS, evaluando la contribución del factor NF-kB en este proceso. Además se investigó el efecto del 17â-estradiol (E2) como regulador de la acción de LPS. Ratas machos fueron tratadas con 10 mg de E2 incorporado en forma subcutánea por 60 d. Luego las hipófisis fueron cultivadas aplicándose: LPS (100ng y 2ug/ml) por 6 y 24h; E2 (100nM) por 4 y 24h; interacción mediante co-incubación LPS-E2 por 24h (I) y sensibilización por pre-incubación con E2 4h seguido de LPS por 24h (S). La expresión de TLR4, sus proteínas asociadas: CD14 y MyD88 así como NF-kB fue determinada por western blot en extractos totales (ET), citosólicos (EC) y nucleares (EN). Además se inmunolocalizaron estas moléculas a nivel óptico y electrónico. Análisis estadístico: ANOVA-Fisher. En ET, LPS solo o en interacción con E2 (I) incrementó la expresión de TLR4, CD14, MyD88 (p< 0.05 vs C) El análisis de EN reveló un aumento de la expresión de NF-kB (p< 0.05 vs C) indicando su translocación en estos modelos. El tratamiento con E2 no indujo cambios en la expresión de TLR4 y NF-kB respecto al control, mientras que la sensibilización con E2 promovió un aumento significativo del factor de transcripción en EC en relación al detectado en EN, resultado que revelaría un rol modulador del E2 en la translocación nuclear de NF-kB. Además, por inmunocitoquímica, se detectó TLR4 en citoplasma asociado a RER y NF-kB en núcleos de lactotropas tratadas con LPS. Se demuestra que LPS, a través de TLR4 y sus moléculas complementarias, promueve la proliferación de lactotropas desencadenando la translocación nuclear de NF-kB. E2 regularía la localización subcelular de NF-kB modulando de este modo la proliferación de lactotropas inducida por LPS.