EXPRESIÓN DEL RECEPTOR FGFR1 EN PITNET Y SU ASOCIACIÓN CON LA REGULACIÓN DE LA PROLIFERACIÓN

SOSA L.; VILLAFAÑE E.; TURINA A; ZLOCOWSKI N; GARCÍA BARBERÁ F.; CECENARRO L.; CALAFAT P; DE BATISTA J; MUKDSI, J; PETITI J. P.

Rosario

Congreso; XIV Congreso Argentino de la Federación de Sociedades de Endocrinología; 2022

El progreso y comportamiento de los tumores neuroendocrinos hipofisarios (PitNET) está asociado a la participación de numerosas moléculas que podrían ser utilizadas como blancos terapéuticos para mejorar los tratamientos farmacológicos actuales. agresivo s. Una alteración frecuente es la del Factor de Crecimiento Fibroblástico básico (FGF2) y su receptor FGFR tipo 1 (FGFR1), cuya desregulación ha sido observada en numerosos neoplásicas y estaría involucrada en la regulación de la proliferación celular.En este sentido nos propusimos determinar la expresión de FGFR1 en PitNET secretantes y no funcionantes (NF) y su participación en la proliferación celular mediante ensayos in vitro. La expresión de FGFR1 fue evaluada en PitNET secretantes (GH n=4 y ACTH n=4) y NF (n=16), mediante inmunohistoquímica y westerb blot (wb) y analizada según los diferentes parámetros clínicos-patológicos. Para los experimentos in vitro, se utilizaron las líneas celulares tumorales somatolactotropas (GH3) y corticotropas (ATt20), que fueron estimuladas con FGF2 (10 y 100 ng/ml). . La viabilidad celular se determinó mediante ensayo MTT después del estímulo con FGF2 por 24-48 h en medio con o sin suero al 10%. La proliferación se determinómediante la captación de BrdU durante 24 h y la fosforilación de ERK1/2 mediante wb después del estímulo con FGF2 por 30 min. Además del estímulo con FGF2, las células fueran co-incubadas con los siguientes estímulos: análogo sosmatostatina, octreotide (OCT, 100 nM), inhibidor de FGFR1 AZD4745 (0,1-10 µM) e inhibidorMEK PD98059 (50 µM). Estadística: test de Kruskal-Wallis y ANOVA-Post-test: Tukey. Los resultados mostraron que el 50% de los PitNET GH y ACTH y el 87,5% de los NF fueron positivos para FGFR1, siendo significativamente mayor en los PitNET NF vs los secretantes (p=0,036). No se observó diferencia significativa respecto al género (p=0,463), grupos etarios de 55 años (p=0,147), l índice de Ki-67 (p=0,223) y tamaño tumoral (p=0,627). En los estudios in vitro, la expresión de FGFR1 fue mayor en GH3 que en ATt20. FGF2 indujo un aumento significativo de la viabilidad celular en GH3 a las 24 y 48 h en ambas dosis, mientras que en las células ATt20, el aumento de la viabilidad celular (p˂0,05) solo se observó después del estímulo con FGF2 (100 ng/mL) por 48 h. Teniendo en cuenta que el efecto de FGF2 en GH3 fue mayor, continuamos trabajando en esta línea celular. Los niveles de expresión de ERK1/2 fosforilada aumentaron después del estímulo con FGF2 (10 y 100 ng/mL) durante 30 min (p˂0,05 vs control). La viabilidad celular y la captación de BrdU fue significativamente mayor en los cultivos tratados con FGF2 a ambas dosis en presencia de suero al 10%, efecto que se revirtió con la co-incubación con AZD y con PD98059 (p