ROL DE LOS AGONISTAS PPARG EN LA REGULACIÓN DE LA SOBREVIDA DE CÉLULAS PROGENITORAS HEMATOPOYÉTICAS

D'ATRI LP; PACIENZA N; POZNER RG; NEGROTTO S; MALAVER E; LAZZARI MA; TORRES O; GÓMEZ RM; SCHATTNER M

Buenos Aires

Congreso; XX Congreso del Grupo Cooperativo Latinoamericano de Hemostasia y Trombosis (CLAHT)- VIII Congreso del Grupo Argentino de Hemostasia y Trombosis (CAHT); 2008

Previamente demostramos que ligandos del PPARγ como el endógeno 15d-PGJ2 (PGJ) y elsintético, ciglitazona (CGZ), inhiben la proliferación de precursores megacariocíticos por arrestodel ciclo celular y apoptosis. Con el fin de profundizar estos hallazgos se analizó el efecto deambas drogas en la formación de colonias megacariocíticas en cultivos semisólidos utilizandocélulas CD34+ aisladas de sangre de cordón umbilical mediante inmunoselección magnética. Elnúmero de colonias disminuyó de manera concentración dependiente (n=3) por el tratamientode las células CD34+ con ambas drogas. Con el fin de estudiar si este efecto era específico dellinaje megacariocítico, células CD34+ fueron expandidas con EPO, IL3, SCF, G-CSF o GM-CSF en presencia de PGJ/CGZ. Posteriormente se evaluó viabilidad celular y apoptosis mediante el ensayo de MTT y microscopía de fluorescencia respectivamente. Ambos agonistas indujeronuna disminución en la viabilidad celular asociada con un incremento significativo en los nivelesde apoptosis independientemente del factor de crecimiento. El efecto de PGJ o CGZ en lacapacidad formadora de colonias granulo/monocíticas, eritroides o mixtas de las células CD34+se confirmó en ensayos clonogénicos en metilcelulosa. Se observó una marcada disminuciónen el número total de colonias obtenidas (control=66±5, PGJ=27±6*, CGZ=13±5*, n=3, p<0,001 vs control) sin distinción entre los linajes. Considerando que PGJ y CGZ actúan pormecanismos dependientes e independientes del PPARγ, analizamos la acción de un inhibidorespecífico de este factor de transcripción (GW9662) o del NF-κB (BAY 11-7082). La apoptosis mediada por PGJ no fue modificada por el tratamiento con GW9662, pero aumentósignificativamente en presencia del BAY (C=10±1, BAY=19±3, PGJ=22±5, ambos=33±6, n=5, p<0,05). Los mecanismos apoptóticos inducidos por ambas drogas incluyen la activación de la vía intrínseca o mitocondrial dado que se observó una disminución del potencial de membrana mitocondrial, una menor expresión de Bcl-xL y activación de caspasa-3 (citometría de flujo). En conjunto estos datos muestran que la PGJ y la CGZ no solo inhiben el crecimiento de megacariocitos sino que también tienen un efecto regulador negativo de la hematopoyesisasociado a una acción indirecta sobre el factor de transcripción NF-κB. Estos hallazgos seríanun aspecto a considerar en el uso terapéutico de la CGZ como hipoglucemiante y delemergente uso de ambas drogas como antineoplásicos.