SEÑALIZACIÓN NO GENÓMICA DEL NF-kappaB EN PLAQUETAS.

MALAVER E; D'ATRI LP; POZNER RG; NEGROTTO S; PACIENZA N; BENZADÓN R; LAZZARI MA; GÓMEZ RM; SCHATTNER M

Buenos Aires

Congreso; XX Congreso del Grupo Cooperativo Latinoamericano de Hemostasia y Trombosis (CLAHT)- VIII Congreso del Grupo Argentino de Hemostasia y Trombosis (CAHT); 2008

El complejo NF-kappaB/I-kappaB tiene un rol crítico en la regulación de la expresión de genes que controlan procesos de diferenciación, proliferación, inflamación, oncogénesis y apoptosis. Previamente se ha demostrado que las plaquetas expresan el factor de transcripción NF-kappaB y que la estimulación con Trombina (TR) promueve la degradación del mismo. En este trabajo evaluamos la relevancia de esta respuesta en la fisiología plaquetaria. La preincubación de plaquetas humanas con un inhibidor específico de este factor de transcripción, Bay 11-7082 (Bay, 100 μM) inhibió la agregación (determinada por turbidimetría, n=5) inducida por ADP (79±8% de inhibición, p<0,0001), colágeno (70±8%, p<0,01) adrenalina (67±6%, p<0,001) y TR (62±11%, n=8, p<0,001). Sin embargo, la agregación gatillada por ácido araquidónico no fue modificada. La liberación de ATP (evaluada por luminiscencia)  estimulada por ADP fue suprimida en presencia de Bay (n=3). La exposición de sitios de unión al fibrinógeno (determinado por unión del PAC-1, citometría de flujo) inducida por TR fue inhibida por Bay (C: 3±1, TR: 47±10, TR+Bay: 22±5%* de células PAC-1+, n=3, *p<0,05 vs TR). En ensayos de Western Blot se observó que la estimulación de plaquetas con TR y ADP induce la degradación de I-kappaB y este fenómeno es revertido en presencia de Bay. Para analizar el rol de NF-kappaB en la activación de plaquetas in vivo, se inocularon ratones con Bay (10 mg/kg) y se evaluó la agregación plaquetaria inducida por ADP. En concordancia con los resultados precedentes, las plaquetas de ratones tratados con Bay mostraron una respuesta inhibida en un 27±3% respecto a los ratones control (n=7, p<0,05). Estos hallazgos revelan una novedosa acción no genómica del complejo NF-kappaB/Ikappa-B y sugieren que la activación del mismo sería otra vía de señalización involucrada en la activación plaquetaria.