Citotoxicidad inducida por partículas de dióxido de titanio en macrófagos.

BRUNO M; OLMEDO D; CABRINI R; FERRARO S; D'ATRI LP; TASAT D

Los Cocos, Cordoba

Congreso; XLIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Odontológica (SAIO); 2010

Los macrófagos son células del sistema inmune que interaccionan con los biomateriales a nivel de la interface metal-tejido. Dentro de los biomateriales metálicos el titanio es uno de los más utilizado como implante en el área biomédica, que presenta una capa de dióxido de titanio (TiO2) que lo recubre. La respuesta biológica al TiO2 dependería de sus propiedades fisico-químicas como composición, forma, tamaño, concentración, etc. Objetivo: evaluar in vitro la citotoxicidad de partículas de TiO2 de diferentes tamaños y concentraciones en macrófagos. Métodos, macrófagos murinos se obtuvieron mediante lavado broncoalveolar, cultivaron en RPMI-1640 con SBF 10% y expusieron a partículas de TiO2  de 10 y 150 nm a diferentes concentraciones (2.5, 5, 10 y 100 µg/mL). Luego de 24 hs. de cultivo se evaluaron los siguientes parámetros funcionales: metabolismo celular mediante el ensayo de MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide), generación del anión superóxido (O2-) mediante la reducción de azul de tetrazolio, liberación del factor de necrosis tumoral (TNFa) mediante ELISA, reducción del número de células mediante recuento celular y  muerte celular (apoptosis y/o necrosis) por coloración diferencial empleando bromuro de etidio y naranja de acridina y por citometría de flujo. Resultados, el metabolismo celular independientemente del tamaño de la partícula mostró una tendencia a disminuir observada solo para la dosis mayor empleada. La generación de O2- (eg: TiO210nm[2.5]: 66,6±7,7; 10nm[10]: 77,4±0,4 vs. Co: 17,5±1,9; p<0.001) y la producción de TNFa (eg: TiO210nm[2.5]: 91,7±3,5; 10nm[10]: 136,7±18,6 vs. Co: 61,4±6,6; p<0.001) aumentaron significativamente de manera dosis dependiente para ambos tamaños de partículas. Asimismo, los cultivos expuestos a ambos tamaños de partículas de TiO2 presentaron reducción en el número de células debido principalmente a la inducción de la muerte celular mediante la vía apoptótica. Conclusiones, el TiO2 generó una citotoxicidad dependiente de la concentración evidenciada por los parámetros evaluados. Sin embargo, a una misma concentración, las partículas de 10nm provocaron una alteración mayor que las de 150nm.