La acidosis extracelular promueve la apoptosis y quiescencia de células CD34+.

D'ATRI LP; ROMANIUK MA; ETULAIN J; TORRES O; MALAVER E; SCHATTNER M

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; 1. LIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC) y LVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2009

Estudios experimentales y clínicos han propuesto al transplante de células progenitoras (CD34+) como terapia para mejorar la revascularización y la regeneración celular en pacientes con infarto de miocardio o accidente cerebro vascular. La acidosis extracelular es un regulador crítico de respuestas de activación y sobrevida de diferentes tipos celulares y característica de procesos isquémicos, inflamatorios y tumorales. Previamente demostramos que el medio ácido induce apoptosis de células CD34+ y que factores de crecimiento con actividad antiapoptótica revertían este efecto. Debido a que el éxito de la terapia celular depende de la sobrevida de las células transplantadas, en este trabajo profundizamos el estudio de los mecanismos asociados al proceso apoptótico gatillado por el medio ácido. La acidificación del medio de cultivo de las células CD34+ (provenientes de sangre de cordón umbilical) gatilla apoptosis (microscopia de fluorescencia utilizando naranja de acridina y bromuro de etidio) de manera dependiente del pH (pH7.4: 23±3, pH7: 46±2* pH6.5: 52±2*%, pH6: 62±3*% n=3) y del tiempo de exposición (0.5 min: 37±3*; 1 min: 42±4*; 10 min: 54±4*, n=3). La exposición de las CD34+ al medio ácido resultó en una pérdida significativa del potencial de membrana mitocondrial (pH7.4=12±3; pH6.5=3,5±2 ratio FL2/FL1 del colorante JC-1, n=3) y en la activación de caspasa-3 (pH7.4= 19±2; pH6.5= 58±8* % células positivas) que fue prevenida por factores de crecimiento (pH6.5+TPO=37±2#). El medio ácido indujo quiescencia de las CD34+, ya que promovió de manera significativa el arresto del ciclo celular en G0 (2,8±0,6 veces vs. pH7,4, n=4). La capacidad clonogénica de las células progenitoras disminuyó en un 22±5% (n=3) cuando fueron expuestas previamente a pH 6,5. (*p<0.05 vs. pH 7,4; #p<0.05 vs. pH 6,5 solo). En conjunto estos resultados indican que el medio ácido gatilla apoptosis, a través de la vía mitocondrial e induce arresto del ciclo celular en las células CD34+.