Blancos moleculares de la vía PI3K/Akt en neuronas de hipocampo sometidas a estrés oxidativo

URANGA, ROMINA MARÍA; GIUSTO, NORMA MARÍA; SALVADOR, GABRIELA ALEJANDRA

Congreso; LVII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2012

La vía PI3K/Akt tiene un reconocido rol en la señalización intracelular involucrada en la plasticidad sináptica y la supervivencia neuronal. Los objetivos de este trabajo fueron: i) caracterizar un modelo de neurodegeneración inducido por Fe2+, y ii) estudiar la participación de la vía PI3K/Akt y su relación con distintos blancos moleculares tales como GSK3beta y los factores de transcripción FoxO en los eventos disparados durante la injuria neuronal oxidativa. En este trabajo se utilizó la línea neuronal de hipocampo de ratón HT22, la cual fue expuesta a diferentes concentraciones de Fe2+ durante 24 h. Los niveles de especies reactivas de oxígeno (medidos con la sonda DCF) se vieron incrementados por la exposición al metal, de igual manera que los productos de peroxidación lipídica (cuantificados por TBARS). La morfología celular mostró alteraciones características del daño: cuerpo celular redondeado con disminución del número de proyecciones neuronales. Las enzimas antioxidantes presentaron un perfil diferencial frente al estrés oxidativo: los niveles de SOD1 disminuyeron, los de catalasa no mostraron cambio, y los de SOD2 y HO1 aumentaron. Simultáneamente, Akt y GSK3beta exhibieron un incremento en sus niveles de fosforilación. Además, se estudió en las fracciones nuclear y citosólica la presencia de las formas fosforiladas (inactivas) de FoxO3a y FoxO1, las cuales aumentaron de manera dependiente de PI3K en la fracción citosólica de las células tratadas con Fe2+. Coincidentemente, el contenido de FoxO3a total disminuyó en la fracción nuclear. Asimismo, se observó la translocación nuclear de PI3K y Akt en respuesta al Fe2+. Estos resultados demuestran que nuestras condiciones experimentales reproducen un modelo de estrés oxidativo incipiente inducido por Fe2+ en neuronas de hipocampo, y que en este modelo, la vía PI3K/Akt se activa, transloca al núcleo, y promueve la fosforilación, inactivación y exportación nuclear de FoxO3a/FoxO1.