Regulación del metabolismo de la fosfatidilcolina por factores de crecimiento en los segmentos externos de los bastones retinianos

SALVADOR, GABRIELA; PASQUARÉ, SUSANA; MATEOS, MELINA; URANGA, ROMINA; GIUSTO, NORMA

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina.

Congreso; I Congreso Nacional de Investigación en Visión y Oftalmología. Simposio Satélite SAIC; 2005

IVO ( Comision de la Sociedad de Investigacion en Vision y Oftalmologia

Los segmentos externos de los bastones retinianos (ROS) son organelas especializadas en el proceso de la fototransduccción.  Además de la rodopsina, que es la encargada de recibir el estímulo lumínico, se ha demostrado que estas membranas poseen receptores de factores de crecimiento tales como la Insulina (Ins) y el factor de crecimiento similar a la Insulina (IGF-1). Sin embargo, el rol de estos factores de crecimiento en la fisiología de los ROS no ha sido elucidado al momento. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de la Ins, el IGF-1 y el factor de crecimiento nervioso (NGF) sobre la fosforilación en tirosinas de las proteínas de los ROS y sobre el metabolismo de la fosfatidilcolina (PC). Para ello, los ROS se purificaron a partir de retinas bovinas bajo luz roja difusa y las incubaciones con los factores de crecimiento mencionados y con [14C]dipalmitoil PC como sustrato se realizaron en las mismas condiciones experimentales. El perfil de proteínas fosforiladas en tirosinas se determinó por Western Blot utilizando un anticuerpo anti-fosfotirosina. Los productos de metabolización de la PC se separaron por cromatografía en capa fina y se cuantificaron por centelleo líquido. IGF (10 nM),  Insulina (175 nM) y  NGF (100 nM) incrementaron la fosforilación en tirosinas de las proteínas de los ROS con respecto a la condición control. A su vez el IGF-1, incrementó en un 30% la generación de diacilglicerol (DAG) a partir de PC, mientras que el NGF incrementó en un 90%, la generación de este segundo mensajero lipídico. Asimismo, la producción de ácidos grasos libres fue estimulada en presencia de Insulina. Nuestros resultados demuestran que las vías de señalización por factores de crecimiento están presentes en los ROS y que dichas vías inducen una metabolización diferencial de la fosfatidilcolina por un mecanismo independiente de la luz.