Efecto de la inhibición de la angiogénesis sobre la foliculogénesis y apoptosis ovárica

TESONE MARTA; ABRAMOVICH DALHIA; RODRIGUEZ CELIN ALEJANDRA; PARBORELL FERNANDA

Mar del Plata, Argentina

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2006

En el adulto, la angiogénesis es infrecuente en condiciones fisiológicas y el endotelio de la mayoría de los tejidos es una población estable y de baja tasa mitótica. Debido a que el ovario es uno de los pocos órganos del adulto que presenta un alto grado de angiogénesis, se ha propuesto a dicho órgano como modelo para su estudio. La adquisición de un adecuado aporte sanguíneo es posiblemente un paso limitante en la selección y maduración del folículo dominante y su atresia, proceso donde la apoptosis juega un rol fundamental. Tanto el folículo ovárico como el cuerpo lúteo producen diversos factores angiogénicos. Mientras que el VEGFA es el principal iniciador de la angiogénesis, la formación y diferenciación de una red vascular madura requiere de la acción coordinada por angiopoyetina 1 y 2 (ANPT1 y ANPT2). El objetivo de este trabajo fue estudiar si el VEGFA y las Angiopoyetinas juegan un papel crítico en la supervivencia celular necesaria para el desarrollo folicular dependiente de gonadotrofinas. En particular, hemos examinado el efecto de la administración local de un antagonista de VEGFA (Trap) y de un anticuerpo anti Angiopoyetina-1 (Ac-Ang) en el desarrollo folicular, la apoptosis y la expresión de proteínas pro o antiapoptóticas de la familia de BCL2 (BAX, BCL2 y BCLX), FAS y FASL en folículos ováricos de ratas prepúberes tratadas con gonadotrofina coriónica equina (eCG). La administración intrabursa de 0,5 mg  de Trap por ovario no produjo cambios en el número de folículos preantrales (PF) ni antrales tempranos (EAF), mientras que disminuyó significativamente el número de folículos periovulatorios (POF) y aumentó el número de folículos atrésicos (AtF), 48 hs post inyección. Se demostró que el tratamiento con Trap produjo un incremento al doble en el número de células apoptóticas (TUNEL) y un aumento significativo en la fragmentación apoptótica espontánea del ADN (Ladder). Por otra parte, la inyección de Trap produjo un aumento significativo de los niveles de BAX y disminuyó los niveles de BCL2 y la relación BCLXL/BCLXs. No se observaron cambios en los niveles de FAS y FASL luego del tratamiento. La administración intrabursa de 10 ng de Ac-Ang provocó una disminución significativa en el número de EAF y un aumento significativo en el número de AtF 48 hs post inyección. No se observaron cambios en el número de PF ni POF. Se produjo un aumento del 200% en el número de células apoptóticas en folículos antrales tempranos y un aumento significativo en la fragmentación apoptótica espontánea del ADN. Hubo además un aumento significativo de los niveles de BAX y disminuyó los niveles de BCL2. La relación BCLXL/BCLXs disminuyó significativamente en los folículos obtenidos de ovarios tratados con el anticuerpo. No se observaron cambios en los niveles de FAS y FASL luego del tratamiento. En conclusión, este es el primer trabajo que demuestra que la inhibición de VEGFA o de ANPT1 produce un aumento de la apoptosis ovárica a través de un desbalance en el cociente de proteínas antiapoptóticas: proapoptóticas relacionadas con la vía mitocondrial, conduciendo a un mayor número de folículos a la atresia.