Regulación de Actividad y Expresión de la Enzima 17alfa hidroxilasa (CYP 17) por un agonista de GnRH

IRUSTA GRISELDA; PARBORELL FERNANDA; ABRAMOVICH DALHIA; TESONE MARTA

Mar del Plata, Argentina

Congreso; Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas SAIC, SAI, SAFE, SAN, SABiología, SABiofísica, SAF; 2004

Las células tecales, al ser estimuladas por LH, sintetizan andrógenos los cuales son utilizados por las células de la granulosa para la producción de estrógenos. En trabajos previos hemos demostrado que un agonista de GnRH (acetato de leuprolide, LA) inhibe el desarrollo folicular y aumenta la apoptosis en células de la granulosa. Nuestro objetivo fue determinar si además, existen alteraciones en la producción de andrógenos en folículos ováricos de ratas tratadas con LA. Para esto, se estimularon ratas prepúberes con gonadotrofinas (PMSG), parte de las cuales fueron inyectadas sc con LA: 2ug/0.1ml/rata. Los animales fueron sacrificados a las 2, 8, 24 y 48 hs post tratamiento y se aislaron folículos antrales para la realización de Western blot y RT-PCR de la CYP 17. Además, se colectó suero para la medición de esteroides. Para los ensayos in vitro, se sacrificaron las ratas 48 hs luego del tratamiento con gonadotrofinas, se aislaron los folículos antrales y se incubaron durante 8, 12, 24 y 48 hs con los siguientes estímulos: grupo control: FSH (20 ng/ml) y grupo LA: FSH (20ng/ml) + LA (100ng/ml). A los tiempos indicados, se extrajeron los esteroides del tejido para la medición de androsterona. LA produjo una disminución significativa (p<0.05) en los niveles de androsterona sérica a las 8hs (C: 25.7±2.8 vs LA:10.4±2.6 ng/ml) y 24 hs (C:24.9±2 vs LA: 12.6±1.6 ng/ml) de tratamiento, como en los niveles proteicos de la CYP 17 a los mismos tiempos, 8hs (C:5.7±0.82 vs LA:3.2±0.26 unidades arbitrarias, UA) y 24hs (C:4.37±0.52 vs LA:2.31±0.41 UA). Este efecto también se produjo en los niveles de ARNm de esta enzima. Estos resultados se correlacionan con ensayos in vitro, donde el agonista inhibió (p<0.05) la producción de androsterona en folículos expuestos durante 24hs a LA (C:581±79.7 vs LA:285.6±94.7 ng/fol.) y 48hs (C:457.7±76 vs LA:207.3±63 ng/fol.). Concluímos que el GnRH sería un factor intraovárico, que inhibe la síntesis de la CYP 17 tecal y como consecuencia la producción de andrógenos.