PAPEL DE LA GALECTINA-8 COMO MODULADOR DE LA ACTIVACIÓN PLAQUETARIA

M A ROMANIUK, M V TRIBULATTI, V CATTANEO, J ETULAIN, O CAMPETELLA, M SCHATTNER

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; LIII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2008

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

La galectina-8 (Gal-8), miembro del grupo tandem-repeat de la familia de galectinas, es una proteína de 35 kDa formada por dos dominios homólogos de reconocimiento a carbohidratos unidos por un péptido. Se expresa en una amplia variedad de tejidos y tumores y parecería estar involucrada en interacciones celulares que involucran a las integrinas como moléculas de adhesión. Mediante MALDI-MS determinamos que Gal-8 se une a la integrina alfa IIb. Considerando que ésta forma parte del complejo glicoproteico IIbIIIa, la molécula más relevante en la función plaquetaria, y que previamente demostramos la capacidad de Gal-1 de promover la activación de plaquetas, se evaluó el efecto de Gal-8 en la fisiología plaquetaria.Los Resultados obtenidos demuestran que la Gal- 8 recombinante es capaz de inducir agregación plaquetaria per se tanto en plaquetas lavadas como en plasma (EC 50= 575± 52 nM, 3450±220 nM, n=3) y de potenciar la respuesta inducida por otros agonistas plaquetarios. Lectinas vegetales como Jacalina o PNA (peanut agglutinin lectin) en concentraciones 100 veces mayores que Gal-8 no fueron capaces de gatillar agregación plaquetaria. La respuesta de agregación por Gal-8 fue inhibida por la preincubación de las plaquetas con lactosa (30mM) y Tiodigalactósido (30mM), pero no por sacarosa (30mM) indicando la especificidad de unión de la Gal-8 a glicanos de superficie. La ausencia de activación por Gal-8 en plaquetas preincubadas con EDTA (2mM) o aspirina (0.5 mM) revelan que la respuesta observada no es un fenómeno de aglutinación y que no involucra la generación de TXA2. Estudios de citometría de flujo demostraron que Gal-8 aumenta los niveles de calcio intracelular, induce la expresión de neoepitopes en el complejo glicoproteico IIbIIIa, promueve la unión de fibrinógeno y gatilla la expresión de P-selectina. Estos datos revelan a las galectinas como importantes reguladores de la funcionalidad plaquetaria2. Estudios de citometría de flujo demostraron que Gal-8 aumenta los niveles de calcio intracelular, induce la expresión de neoepitopes en el complejo glicoproteico IIbIIIa, promueve la unión de fibrinógeno y gatilla la expresión de P-selectina. Estos datos revelan a las galectinas como importantes reguladores de la funcionalidad plaquetaria