Variaciones transcripcionales de la cepa degradadora de PAH Burkholderia sp. Bk en co-cultivo con otra cepa degradadora

NIETO, ESTEBAN*, MACCHI MARIANELA, MORELLI IRMA, BIBIANA COPPOTELLI

Valparaíso,

Simposio; 1st International Symposium on Microbial Ecology América Latina - ISME-LA,; 2019

International Society of Microbial Ecology

Las interacciones interespecíficas son fundamentales en consorcios microbianos responsables de procesos degradativos. En trabajos anteriores en co-cultivose encontraron evidencias que la cepa degradadora Sphingobium sp. AM sería la responsable del ataque inicial al fenantreno. Este trabajo tuvo como objetivo estudiar las variaciones en la expresión de genes catabólicos de la degradación de fenantreno en Burkholderiasp. Bk.cuando conforma un co-cultivo con AM, ambas cepas fueronaisladas de un consorcio natural degradador de PAH.Se preparó el co-cultivo AM-Bk(proporción 65:35) en MML con 200 mg/L del hidrocarburo. Se utilizaron primers, diseñados a partir del genoma de Bk, dirigidos a genesque codifican enzimas dioxigenasa de la vía alta (Naph y Biph) y de la vía baja de degradación (Tol, Sal y Cat) (RT-qPCR) (2, 8, 24 y 72 hs). Los datos se analizaron mediante el método de ΔΔCt (gen de referencia: gen ribosomal 16S). Como condición de referencia se utilizó las 2 hs de incubación. En el análisis por RT-qPCR, el cultivo mixto mostró sub-expresión de los genes Naph y Biph desde las 24 hs de incubación ysobre-expresión de los genes Saly Cat a las 72 hs de incubación con respecto al cultivo puro.Adicionalmente en el co-cultivo a las 72 hs hubo mayor expresión de todos los genes de la vía baja estudiados con respecto a las 8 hs. Los resultados obtenidos confirman la complementación de ambas cepas en la degradación de fenantreno, demostrando que Bk intervieneprincipalmente en la degradación de compuestos intermediarios.