ESTUDIO MICROBIOLÓGICO Y MOLECULAR DE LA COMUNIDAD BACTERIANA DE SEDIMENTOS DE CURSOS DE AGUA DULCE AFECTADOS POR LA ACTIVIDAD HUMANA

MADUEÑO L.; B.M. COPPOTELLI; TERADA C; VIDAL NC; ONETO ME; DEL PANNO M.T.; MORELLI I. S

Buenos Aires

Congreso; III Congreso de la División Microbiología Agrícola y Ambiental (DIMAyA) de la Asociación Argentina de Microbiología-CAMAYA 2015; 2015

División Microbiología Agrícola y Ambiental (DIMAyA) de la Asociación Argentina de Microbiología-

La autodepuración de los cursos de agua impactados por la actividad humana se basa principalmente en la sedimentación de los sólidos en suspensión. Este proceso de sedimentación crea un efecto memoria en los sedimentos del lecho, quedando registro de los diferentes de compuestos (orgánicos o inorgánicos) incorporados al curso de agua. Por otro lado, los sedimentos poseen una gran diversidad microbiana y concentración de biomasa, debido a sus condiciones inherentemente anaeróbicas y a la abundancia de fuentes de carbono, actuando como una biobarrera natural capaz de degradar los contaminantes orgánicos. El objetivo de este trabajo fue desafiar las técnicas microbiológicas convencionales y los métodos moleculares de última generación, para determinar el potencial degradativo del microbioma nativo de una muestra de sedimento proveniente de un curso de agua dulce con historia de afectación con hidrocarburos. Sobre la muestra de sedimento se realizaron recuentos de bacterias heterótrofas aerobias (placas de R2A) y anaerobias (extinción en Medio Fluido Tioglicolato), sulfato reductoras (extinción en MédioPostgate B), degradadoras de hidrocarburos alifáticos y degradadoras de policíclicos aromáticos (PAH) (NMP en medio mineral líquido y, como única fuente de Carbono y Energía, hexadecano o mezcla de PAH, respectivamente). La actividad microbiana total se determinó a través de la actividad de las enzimas deshidrogenasa e hidrolasa. Se extrajo el DNA total y se realizó PCR con cebadores dirigidos a genes funcionales vinculados a la degradación de hidrocarburos y pirosecuenciación del gen 16 rRNA.Se obtuvieron recuentos con valores por gramo de sedimento seco de 3,4x105 para bacterias heterótrofas aerobias, 2,4x106 para heterótrofas anaerobias, 2,2x103 para sulfatos reductoras, 5,8x102 para bacterias degradadoras de hidrocarburos alifáticos y menores a 6,0x101 para bacterias degradadoras de PAH. Fue posible detectar la actividad de enzimas deshidrogenasa e hidrolasa. A través de la amplificación con cebadores específicos se logró evidenciar la presencia de genes de la vía alta y baja de degradación de los PAH. Como resultados de la pirosecuenciación se obtuvieron 1031 secuencias. El análisis de las secuencias reveló la presencia de tres géneros de Archaeametanogénicas, Methanobacterium, Methanospirillum y Methanolinea. Dentro del dominio Bacteria se encontraron secuencias correspondientes a los géneros Moorella y Syntrophus característicamente relacionados con las rutas de degradación metanogénicas. Otro de los géneros predominantes corresponde a Pseudomonas, ampliamente reconocidas por su capacidad de degradar aeróbicamente hidrocarburos, tanto alifáticos como PAH.Los ensayos seleccionados nos ha permitido detectar la presencia de microorganismos con la potencialidad de degradar hidrocarburos, tanto en condiciones aeróbicas como anaeróbicas. Ambas rutas degradadoras podrían aportar a la disminución de la concentración del contaminante.