METAGENÓMICA FUNCIONAL DE UN CONSORCIO BACTERIANO DEGRADADOR DE HIDROCARBUROS POLICÍCLICOS AROMÁTICOS

FESTA S; MADUEÑO L.; LOVISO C; COPPOTELLI, BM; MORELLI I. S

Buenos Aires

Congreso; III Congreso de Microbiología Agricola y Ambiental; 2015

Division Agricola y Ambiental de la AAM

Laautodepuración de los cursos de agua impactados por la actividad humana se basaprincipalmente en la sedimentación de los sólidos en suspensión. Este procesode sedimentación crea un efecto memoria en los sedimentos del lecho, quedandoregistro de los diferentes de compuestos (orgánicos o inorgánicos) incorporadosal curso de agua. Por otro lado, los sedimentos poseen una gran diversidadmicrobiana y concentración de biomasa, debido a sus condiciones inherentementeanaeróbicas y a la abundancia de fuentes de carbono, actuando como unabiobarrera natural capaz de degradar los contaminantes orgánicos. Elobjetivo de este trabajo fue desafiar las técnicas microbiológicasconvencionales y los métodos moleculares de última generación, para determinarel potencial degradativo del microbioma nativo de una muestra de sedimentoproveniente de un curso de agua dulce con historia de afectación conhidrocarburos. Sobrela muestra de sedimento se realizaron recuentos de bacterias heterótrofasaerobias (placas de R2A) y anaerobias (extinción en Medio Fluido Tioglicolato),sulfato reductoras (extinción en Médio Postgate B), degradadoras dehidrocarburos alifáticos y degradadoras de policíclicos aromáticos (PAH) (NMPen medio mineral líquido y, como única fuente de Carbono y Energía, hexadecanoo mezcla de PAH, respectivamente). La actividad microbiana total se determinó através de la actividad de las enzimas deshidrogenasa e hidrolasa. Se extrajo elDNA total y se realizó PCR con cebadores dirigidos a genes funcionales vinculadosa la degradación de hidrocarburos y pirosecuenciación del gen 16 rRNA.Seobtuvieron recuentos con valores por gramo de sedimento seco de 3,4x105 parabacterias heterótrofas aerobias, 2,4x106 para heterótrofasanaerobias, 2,2x103 para sulfatos reductoras, 5,8x102para bacterias degradadoras de hidrocarburos alifáticos y menores a 6,0x101para bacterias degradadoras de PAH. Fue posible detectar la actividad deenzimas deshidrogenasa e hidrolasa. A través de la amplificación con cebadoresespecíficos se logró evidenciar la presencia de genes de la vía alta y baja dedegradación de los PAH. Como resultados de la pirosecuenciación se obtuvieron1031 secuencias. El análisis de las secuencias reveló la presencia de tresgéneros de Archaea metanogénicas, Methanobacterium,Methanospirillum y Methanolinea. Dentro del dominioBacteria se encontraron secuencias correspondientes a los géneros Moorella y Syntrophus característicamente relacionados con las rutas dedegradación metanogénicas. Otro de los géneros predominantes corresponde a Pseudomonas, ampliamente reconocidas porsu capacidad de degradar aeróbicamente hidrocarburos, tanto alifáticos comoPAH.Losensayos seleccionados nos ha permitido detectar la presencia de microorganismoscon la potencialidad de degradar hidrocarburos, tanto en condiciones aeróbicascomo anaeróbicas. Ambas rutas degradadoras podrían aportar a la disminución dela concentración del contaminante.