INVESTIGADORES
COPPOTELLI Bibiana Marina
congresos y reuniones científicas
Título:
Estudio de la ruta de degradación de fenantreno de Sphingomonas paucimobilis 20006FA
Autor/es:
. IBARROLAZA A., COPPOTELLI B.M., ALLEGRETTI P., DONATI E.R., Y MORELLI I.S
Lugar:
Córdoba, Argentina
Reunión:
Congreso; XI Congreso Argentino de Microbiología; 2007
Institución organizadora:
Asociación Argentina de Microbiología
Resumen:
La biorremediación
es una estrategia efectiva para el tratamiento de suelos contaminados con hidrocarburos
policíclicos aromáticos (PAH), siendo la degradación microbiológica el proceso
predominante que conduce a su eliminación. Es importante que los
microorganismos responsables del proceso posean una ruta metabólica completa
para evitar la acumulación en el suelo de productos de degradación
potencialmente tóxicos. Sin embargo, en general los PAH de alto peso molecular
son parcialmente degradados y raramente utilizados como única fuente de carbono
y energía por las bacterias.
El objetivo de
este trabajo fue aislar y caracterizar productos del metabolismo del fenantreno,
incursionando en el estudio de las rutas metabólicas de degradación de
fenantreno de Sphingomonas paucimobilis
20006FA. Esta cepa es capaz de
degradar fenantreno y ha sido eficazmente probada en ensayos de inoculación de
suelos contaminados con PAH.
Se realizo un
cultivo de S. paucimobilis 20006FA en
medio mineral líquido suplementado con fenantreno como única fuente de carbono
y energía, se incubo con agitación a 24 °C. Cuando el cultivo llegó a fase estacionaria se realizó una
extracción con hexano, seguida de una extracción con acetato de etilo y por
ultimo se acidifico la fase acuosa hasta PH 2.5 y se extrajo nuevamente con
acetato de etilo. Los extractos se analizaron
mediante HPLC utilizando una columna C-18 en condiciones ácidas. Se
determinaron los tiempos de retención y los espectros UV de los picos encontrados
y se compararon con estándares en iguales condiciones de trabajo. Los extractos
se analizaron mediante HPLC-masa en condiciones alcalinas para determinar los
pesos moleculares de los productos de degradación encontrados.
La cepa
estudiada fue capaz de crecer utilizando fenantreno como única fuente de
carbono y energía. Se comprobó que la cepa posee actividad dioxigenasa
constitutiva (oxidación del indol a índigo), por lo que la degradación de
fenantreno sería iniciada por una dioxigenación. La acumulación de un producto de
peso molecular (HPLC-masa) coincidente con el ácido 1-hidroxi-2-naftoico,
permitiría deducir el clivaje extradiol del correspondiente diol. Otro
metabolito fue identificado como ácido salicílico en base a su peso molecular,
su espectro-UV y su tiempo de retención, por lo que la cepa seguiría la degradación
a través del meta clivaje. Se determinó la capacidad de la cepa de crecer
utilizando salicilato como única fuente de carbono y energía.
Los resultados
encontrados indicarían la presencia de una ruta de degradación completa, capaz
de producir la mineralización del fenantreno, sin embargo se determinó la
acumulación de dos productos de degradación.