Estudio de un consorcio bacteriano degradador de PAH obtenido a partir de suelos crónicamente contaminados de la provincia de buenos aires

S. FESTA; B.M. COPPOTELLI; M.T. DEL PANNO; I.S. MORELLI

Buenos Aires

Congreso; XII Congreso Argentino de Microbiología; 2010

Asociación Argentina de Microbiología

En ambientes altamente modificados, como los representados por suelos antiguamente contaminados, el proceso de “envejecimiento” del contaminante hace difícil su biodegradación debido a una disminución de la biodisponibilidad por unión a la materia orgánica del suelo. Por estos motivos el éxito de la biorremediación de un suelo crónicamente contaminado con hidrocarburos policíclicos aromáticos (PAH) puede requerir la aplicación de estrategias especiales dependiendo del tipo, grado y antigüedad de la contaminación. La estrategia de bioaumento utilizando consorcios bacterianos degradadores podría aumentar la diversidad microbiana y recuperar las capacidades funcionales de suelos crónicamente contaminados El presente estudio tuvo como objetivo la obtención y caracterización de un consorcio bacteriano degradador de fenantreno a partir de un suelo crónicamente contaminado con PAH. Se obtuvo un consorcio bacteriano degradador de fenantreno, mediante técnicas de cultivos batch en medio mineral líquido (MML) con fenantreno, a partir de un suelo crónicamente contaminado del barrio Mosconi (Buenos Aires, Argentina) ubicado en la zona de influencia del polo petroquímico Ensenada. El consorcio obtenido se conservó fraccionado a -80ºC. Se determinó la composición bacteriana del mismo a nivel de cultivables (aislamiento, caracterización fenotípica y secuenciación del gen 16S RNA) y no cultivables (PCR-DGGE). El consorcio fue inoculado en MML con 200 mg. Kg-1 de fenantreno como única fuente de carbono y energía, los cultivos fueron incubados a 26 ºC durante 15 días. Sobre estos cultivos se estudió: la cinética de degradación de fenantreno y la aparición del acido1-hidroxi 2-naftoico (AHN) (metabolito intermediario de una de las vías de degradación del fenantreno) (HPLC) y la dinámica en la estructura y composición bacteriana (recuento de poblaciones heterótrofas en R2A y de degradadoras PAH por la técnica del NMP y PCR-DGGE). A partir del consorcio obtenido fue posible aislar 5 poblaciones bacterianas con características macroscópicas distintivas. Todos los aislados resultaron bacilos Gram (-), nitrato (+) y oxidasa (-). La secuencia de gen 16SRNA del aislado que presentaba colonias amarillas mostró que estaba filogenéticamente relacionada con Sphingobium spp, otro aislado (colonias transparentes y oxidador de glucosa) fue identificado como Pseudomonas spp., mientras 2 de los otros 3 aislados, fermentadores de glucosa que presentaban colonias blancas, fueron identificados como pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae. El patrón de bandas del gel de DGGE reveló que el consorcio posee mayor diversidad que la encontrada por el análisis mediante las técnicas de cultivo. Las curvas de eliminación de fenantreno obtenidas a partir del consorcio creciendo en fenantreno mostraron una eliminación del mismo del 59%, luego de 15 días de incubación y un aumento sostenido en la concentración de AHN. La dinámica de las poblaciones cultivables demostró importantes cambios en la composición del consorcio durante toda la experiencia, que no pudieron observarse a nivel de estructura genética (PCR-DGGE).