Efectos del Factor Natriurético Atrial sobre la dopamina a nivel renal

M. CHOI,; P. SCHVARTZ

Facultad de Farmacia y Bioquímica, UBA

Congreso; 1° Congreso Nacional de Estudiantes de Bioquímica; 1999

Facultad de Farmacia y Bioquímica, UBA

Introducción: A nivel renal los inhibidores de la dopamina (DA) disminuyen los efectos natriuréticos y diuréticos del factor natriurético atrial (ANF) lo que sugiere  que el ANF puede actuar por mecanismos dopaminérgicos Objetivos: Demostrar que el ANF afecta la captación y la liberación de DA a nivel   renal. Materiales y métodos: Se usaron ratas Sprague Dawley de 250-350 g de peso. Se extrajeron sus riñones. Se separaron tres zonas: corteza externa, corteza yuxtaglomerular y medula. Los experimentos se realizaron in vitro a 37º C, PH 7.4, burbujeo con cárbogeno. A: Determinación de captación de DA.  A1:Captación de DA en función del tiempo: 1) Preincubación 15 min. en presencia de cocaína (Co) 30 mM. 2) Incubación en presencia de Co 10 mM y 3H-DA 1.25 mCi a los 1, 5, 10, 20 y 30 min. Se tomaron dos grupos, uno control y otro con ANF 100 nM. 3) 7 lavados con Krebs (KB) frío. 4) Homogeneización de tejidos. 5) centrifugación. 6) Extracción del sobrenadante. 7)Determinación de la actividad de 3H-DA por conteo de centelleo líquido A2: Captación de DA con distintas concentraciones de ANF. 1) Similar a A1 2) Incubación en presencia de Co 10 mM y 3H-DA 1.25 mCi 30 min. Se tomaron cuatro grupos, uno control y tres experimentales con ANF 1, 10 y 100 nM. 3) a 7) Similar a A1. B: Determinación de la liberación de DA 1) Preincubación: similar a A1. 2) Incubación: similar a A1 3) Liberación durante 120 min. 4)Recolección de muestras de 0 a 120 min. Se tomaron dos grupos, uno control y otro experimental con ANF 100 nM  5) Similar a A1-7. Resultados: El ANF 10 y 100 nM estimularon la captación de DA en las tres zonas estudiadas a los 30 min. de incubación. La concentración 1 nM fue inefectiva. La curva de liberación de DA  mostró una pendiente típica de los tejidos extraneuronales, careciendo de la meseta de los tejidos neuronales. El ANF no alteró la liberación de DA. Dado el alto grado de endopeptidasas presente en los epitelios renales, se incubó con ANF en presencia del inhibidor Thiorfan, con el objeto de descartar la ausencia de efecto del peptido por su degradación no observándose en este caso modificaciones. El bloqueo de la captación extraneuronal con hidrocortisona inhibe el efecto del ANF, confirmando el efecto de una captación de tipo extraneuronal. La inhibición del GMPc con azul de metileno disminuyó el efecto del ANF sobre la captación de DA, demostrando que efecto del péptido se produce a través de la estimulación de receptores A (de tipo biológico) que tienen al GMPc como segundo mensajero. Conclusiones: A nivel renal, el ANF incrementa la captación de DA pero no modifica la liberación de ésta. Por lo tanto parte de los efectos natriureticos del ANF pueden ser mediados por la DA renal.