CUANTIFICACIÓN DE GLIFOSATO Y AMPA UTILIZANDO MATRICES DE EXCITACIÓN-EMISIÓN DE FLUORESCENCIA, APLICANDO PARAFAC Y MCR-ALS

ANA LAURA PÉREZ; GERMÁN H. SÁNCHEZ; MARÍA S. SOBRERO; AGUSTINA V. SCHENONE; NILDA R. MARSILI

Mendoza

Congreso; 7º Congreso Argentino de Química Analítica; 2013

Asociación Argentina de Químicos Analíticos

La provincia de Santa Fe es una de las mayores productoras de granos del país. El uso indiscriminado de plaguicidas es frecuente y los efectos producidos por éstos son muy graves para la salud. El glifosato es uno de los más ampliamente utilizados en nuestra región; éste es degradado en el suelo generando el subproducto AMPA, el que posee una toxicidad similar a la del glifosato. Existen numerosas publicaciones que asocian la exposición prolongada a dosis subletales de estos plaguicidas con patologías como cáncer, malformaciones congénitas, afecciones neurotóxicas, trastornos inmunes, reducción de la fertilidad y abortos espontáneos, entre otros [1,2,3]. En el presente trabajo se desarrolló un método más sencillo y más rápido que los descriptos en la bibliografía. Se cuantificó glifosato y AMPA simultáneamente, separándolos mediante métodos quimiométricos, sin recurrir a técnicas separativas [4,5]. Ambos analitos fueron derivatizados con NBD-Cl a 90 °C durante 15 minutos en medio alcalino (buffer fosfato-borato pH 9) y metanol. Se enfría durante 5 minutos en un baño de hielo, se acidifica el medio con HCl y se lleva a volumen final con metanol, lo cual incrementa la señal de fluorescencia. Se prepararon dos juegos de calibración de cinco soluciones cada una, por duplicado, utilizando solución patrón de glifosato en un rango de 0 a 260 μg L-1 y AMPA en un rango de 0 a 800 μg L-1, respectivamente; además se procesaron cuatro muestras artificiales, por duplicado, conteniendo ambos analitos. Las matrices de excitación-emisión de todas las soluciones se obtuvieron: excitando en un rango de longitudes de onda de 400 a 500 nm cada 10 nm, y se registró la emisión en un rango de 500 a 610 nm cada 10 nm. Al predecir las concentraciones de glifosato en las muestras artificiales aplicando PARAFAC se obtuvieron porcentajes de recuperación entre 91 y 126 %, y al aplicar MCR-ALS los porcentajes de recuperación resultaron entre 75 y 88 %. Al predecir las concentraciones de AMPA en las muestras artificiales aplicando MCR-ALS los porcentajes de recuperación resultaron entre 102 y 116 %, mientras que los resultados al aplicar PARAFAC se encontraron demasiado alejados del valor real. El rango de concentraciones de trabajo obtenidos para este nuevo método es comparable con los límites aceptados por la comunidad europea y la FAO/OMS; por ejemplo, el límite aceptado de glifosato en leche es de 500 μg Kg-1 y en maíz de 5000 μg Kg-1. [1] European Commission Health & Consumer Protection Directorate-General. "Appendix II End Points and Related Information 1. Toxicology and metabolism". (2002) http://forskarbloggen.typepad.com/forskarbloggen/files/list1_glyphosateen.pdf [2] Mañas F.; Peralta L.; Raviolo J.; García O. H.; Weyers A.; Ugnia L.; Gonzalez C. M.; Larripa I.; Gorla N. Environmental Toxicology and Pharmacology. 28 (2009) 37-41. [3] Mañas F.; Peralta L.; Raviolo J.; García O. H.; Weyers A.; Ugnia L.; Gonzalez C. M.; Larripa I.; Gorla N. Ecotoxicology and Environmental Safety. 72 (2009) 834-837. [4] Young, J.C.; Khan, S.U.; Marriage, P.B. J. Agric. Food Chem. 25 (1977) 918 [5] Herbert, P.; Santos, L.; Bastos, M.; et al. J. of Agric. and Food Chem. 55 (2002) 2755-2759.