INVESTIGADORES
ARANA Eloisa Irene
congresos y reuniones científicas
Título:
Mecanismos inmunológicos involucrados en la respuesta de anticuerpos a gangliósidos utilizados como blanco en terapia antitumoral
Autor/es:
ARANA E. I; VENIER, C; GUTHMANN, M; FAINBOIM, LEONARDO
Lugar:
Cordoba
Reunión:
Congreso; Congreso Anual Sociedad Argentina de Inmunología; 2013
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Inmunología
Resumen:
El N-glicolil GM3 (NGcGM3) es un antígeno (Ag) tumoral, un gangliósido de expresión restringida a células cancerosas. Hay
cantidades detectables de anticuerpos (Acs) aNGcGM3 en sueros humanos normales. Por
la naturaleza química del Ag, nuestra hipótesis de trabajo es que el mecanismo inmunológico implicado en la generación in vivo de estos Acs naturales involucra
la cooperación de linfocitos B (LB) y células iNKT, mediada por la presentación del Ag en un contexto CD1d.
Utilizando un aIgG1 biotinilado, comprobamos la unión de
una fusión recombinante CD1d-IgG1 a
placas tratadas con Ag/MeOH o MeOH como control, revelando la biotina
inmovilizada por un ensayo colorimétrico (p<0,05 en la diferencia de medias entre la DO de
placas con Ag/MeOH y aquellas con MeOH, t-test
no apareado). Extendimos esta observación a células que sobreexpresan NGcGM3 en
superficie (X63). Al agregar CD1d-IgG1
al medio de cultivo, observamos su unión a la membrana de X63 mediante
citometría de flujo, empleando un aIgG1-PE. Aplicando
la misma técnica, pero con un Ac que reconoce el residuo N-Gc del Ag (14F7) detectamos,
post cultivo en medio con NGcGM3, la unión del Ag a la superficie de linfoblastos
transfectados con CD1d. En ambos casos, el desplazamiento de la MFI de toda la población
resultó en más del doble en relación al control correspondiente (p<0,5). Repetimos
el resultado con LB primarios. En todos los casos, la unión del isotipo IgG1
resultó inapreciable. Finalmente, mediante un modelo de co-cultivo con LB y
NKT primarias humanas, detectamos por expresión de Ki 67, un aumento reproducible
(triplicados) en la proliferación de ambas poblaciones celulares en
presencia del Ag.
Concluimos que en
humanos, NGcGM3 es un ligando de CD1d. Más aún, los LB humanos pueden presentar
NGcGM3 a células iNKT primarias. Como
resultado de esta interacción, ambas poblaciones proliferan. No hay
antecedentes en la literatura de este tipo de estudios con células primarias
humanas con un ligando endógeno