Marcadores moleculares neutros para la caracterización de Aspergillus fumigatus aislados de alimentos para animales en Argentina? (abstract n° A2853567)

PENA GABRIELA; COELHO IRENE; ALONSO VERONICA; AMINAHUEL CARLA; FOCHESATO ANALIA; ROSA CARLOS; CAVAGLIERI LILIA

Medellín

Congreso; VIII Congreso Latinoamericano de Micología; 2014

En este trabajo se evaluaron cepas A. fumigatus sensu lato (identificados en base a caracteres morfológicos y fisiológicos) mediante marcadores moleculares neutros como el PCR-RFLP y RAPD para la confirmación de su estado taxonómico a nivel de especie y la estimación de su variabilidad genética. A partir de 143 cepas de A. fumigatus sensu lato aisladas de diferentes alimentos para animales en Argentina, se seleccionaron 35 que fueron caracterizadas mediante PCR-RFLP. Se utilizó la enzima de restricción BccI para la digestión de los amplicones benA (β-tubulina) y los fragmentos obtenidos se resolvieron en geles de agarosa al 1,5%. El patrón genético originado fue idéntico a los controles positivos A. fumigatus sensu stricto RC2063 y RC2108. Seguidamente, las mismas 35 cepas caracterizadas mediante PCR-RFLP y otras 35 que incluyeron cepas aisladas de alimentos para animales y casos clínicos de aspergilosis humana y animal en Brasil, fueron evaluadas mediante el marcador RAPD utilizando los cebadores arbitrarios PELF y URP1F. Se observó un patrón genético similar entre todas las cepas de A. fumigatus analizadas. Luego del análisis de clusters, todas las cepas conformaron un mismo grupo y se agruparon con elevado valor de soporte estadístico (99%) con las cepas de referencia A. fumigatus sensu stricto CBS 127.801 y CBS 127.278, independientemente de su origen de aislamiento y región geográfica (Argentina o Brasil). Además, presentaron una similitud genética del 78% evidenciando variabilidad genética a nivel intraespecífico. Finalmente, el secuenciamiento del gen benA de cepas seleccionadas permitió confirmar definitivamente que pertenecen a la especie A. fumigatus sensu stricto. Los resultados de este trabajo sugieren que las cepas involucradas en la aspergilosis humana y animal procederían del ambiente animal en donde A. fumigatus sensu stricto es frecuentemente encontrado. Los trabajadores rurales y los animales estarían constantemente expuestos.