DETECCIÓN DE LA MUTACIÓN L925V ASOCIADA A RESISTENCIA A PIRETROIDES EN VARROA DESTRUCTOR

QUINTANA SILVINA1, MITTON GIULIA2,4, MEDICI SANDRA,DE PIANO FIORELLA 4,5 , EGUARAS MARTÍN2,3, MAGGI MATÍAS2,3 RUFFINENGO SERGIO5

Misiones

Congreso; XI Congreso Latinoamericano de Apicultura; 2014

INTA PROAPI

La constante aplicación de piretroides para el control de Varroa destructor, ha ocasionado la aparición de poblaciones de ácaros resistentes a estos acaricidas. Se ha descripto la existencia de varias mutaciones en el gen del canal de sodio vinculadas a la resistencia, de las cuales la mutación L925V, genera la sustitución de una leucina por una valina en el dominio IIS5 del gen. El objetivo de este estudio fue desarrollar una metodología de PCR en tiempo real con posterior análisis por High Resolution Melting (HRM), para la detección de la mutación L925V asociada a resistencia a piretroides en Varroa destructor. Se compararon diferentes técnicas para la extracción de ADN a partir de dos poblaciones de ácaros mediante la utilización de kits comerciales. Las reacciones de PCR se realizaron con una mezcla preformada con el intercalante fluorescente EvaGreen, en un volumen final de 20 µl. Luego de la amplificación, se efectuó una curva de melting de alta resolución de 72 a 95 ºC, con un delta de temperatura de 0,1 ºC. Se logró desarrollar exitosamente una metodología de extracción de ADN que permite la extracción del material genético de hasta un solo ácaro. Además, se puso a punto una metodología de PCR en tiempo real con posterior análisis por HRM, para la detección de la mutación L925V asociada a resistencia a piretroides en muestras de ADN extraído de Varroa destructor. En las poblaciones estudiadas, no se encontró la mutación. No obstante, la metodología desarrollada permitirá estudiar diferentes poblaciones de Varroa destructor y determinar la base genética de la resistencia a los piretroides. Esta nueva herramienta podrá ser utilizada en futuros monitoreos de la susceptibilidad a los piretroides, con el fin de mejorar significativamente los planes de manejo integrado establecidos para la varroosis, en las diferentes regiones apícolas de Argentina.