El transporte de aminoácidos catiónicos de Trypanosoma cruzi ocurre en el bolsillo flagelar y es el primer paso regulable de las rutas metabólicas

MELISA SAYÉ, MARIANA R. MIRANDA, LEÓN A. BOUVIER, MARÍA DE LOS MILAGROS CÁMARA Y CLAUDIO A. PEREIRA.

Mar del Plata

Congreso; IX Congreso Argentino de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2011

sociedad argentina de protozoologia

Los organismos protozoarios adaptados al parasitismo fueron reemplazando a largo de su evolución rutas metabólicas de biosíntesis por sistemas de transporte de metabolitos esenciales desde el medio extracelular. Como consecuencia, muchas vías metabólicas dependen únicamente de procesos de transporte, haciendo del transporte un mecanismo fundamental para la supervivencia del parásito. Trypanosoma cruzi cuenta con una familia numerosa de permeasas de aminoácidos denominada TcAAAP, algunos de cuyos miembros han sido previamente caracterizados. Un aspecto interesante de esta familia es que no se han encontrado ortólologos en mamíferos y a diferencia de lo que ocurre en la mayoría de los organismos, existen evidencias de que este parásito es capaz de transportar de manera mono-específica los aminoácidos básicos arginina y lisina. En este trabajo se propone validar al transportador de arginina TcAAP3 y confirmar la mono-especificidad por este sustrato. A su vez se pretende estudiar la localización subcelular poniendo a prueba la hipótesis de que los miembros de la familia TcAAAP se encuentran ubicados en la misma región de la superficie celular, el bolsillo flagelar. Por último, se analizará la participación de este transportador en el metabolismo de arginina del parásito. Mediante la generación de parásitos transgénicos que sobre-expresan al transportador logramos validar al TcAAP3 como una permeasa funcional que transporta específicamente arginina y no otro aminoácido básico como lisina puesto que un exceso molar de 100 veces no produjo cambios en el transporte de arginina. Por otro lado, mediante la fusión a proteínas fluorescentes pudimos establecer su localización en el bolsillo flagelar, cerca del collar del bolsillo y más aún, determinamos su co-localización con el transportador de lisina TcAAP7 previamente caracterizado. Finalmente, observamos que el TcAAP3 actúa como un regulador del metabolismo de arginina ya que parásitos con un aumento significativo en el transporte de este aminoácido presentaron niveles disminuidos de la enzima arginina quinasa en la fase estacionaria de cultivo. El Mal de Chagas es una enfermedad que afecta millones de persona; la situación actual es especialmente crítica puesto que las terapias disponibles son escasas e ineficientes, por lo tanto la búsqueda de nuevos tratamientos es prioritaria en nuestro país. Como se mencionó anteriormente, una de las características más relevantes de toda esta familia de transportadores es la ausencia de homólogos en mamíferos, indicando que cada uno de sus miembros podría ser un potencial blanco terapéutico para la enfermedad de Chagas. Además, otro punto importante es que los resultados obtenidos en el presente trabajo sostienen la hipótesis de que los transportadores podrían actuar como puerta de entrada específica para nuevas drogas tripanocidas.