Análisis de la respuesta inmunológica inducida por Toxoplasma gondii en ratones vacunados con el inhibidor de serin proteasas TgPI-1 en un protocolo tipo prime-boost

SÁNCHEZ VANESA ROXANA; FENOY IGNACIO; PICCHIO MARIANO; GOLDMAN ALEJANDRA; MARTIN VALENTINA

Congreso; IX Congreso de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2011

Toxoplasma. gondii es un protozoario que infecta al hospedador mediante la ingestión oral de quistes tisulares u ooquistes induciendo una fuerte respuesta inmune tipo Th1 y confiriendo inmunidad contra una re-infección. Previamente demostramos que una forma recombinante del inhibidor de serin proteasas-1 (rTgPI-1) de T. gondii combinado con aluminio (alum), confiere protección parcial contra la infección en ratones C3H/HeN (H-2k) luego de un desafío no letal con quistes tisulares. Esta misma formulación no indujo protección en ratones C57BL/6 (H-2b) altamente susceptibles a la infección. El diseño de un protocolo de tipo prime-boost con 2 dosis de rTgPI-1+alum por vía intradérmica y 2 dosis de rTgPI-1+CpG por vía intranasal, logró alcanzar el mismo nivel de protección que en ratones C3H/HeN. Esta estrategia indujo una respuesta humoral específica del tipo Th1 y una respuesta celular in vivo e in vitro caracterizada por un incremento de células T CD4+ y CD8+. Continuando con el análisis de la respuesta inmune en ratones C57BL/6, en este trabajo se analizó in vitro la capacidad neutralizante de los anticuerpos generados luego de la vacunación. Los resultados mostraron que el suero de ratones inmunes disminuyó significativamente (30%) la invasión de los parásitos comparado con el suero de ratones naive. Finalmente, analizamos la respuesta inmune generada en los ratones vacunados luego del desafío con el parásito. Los ratones fueron infectados por vía oral con quistes titulares de T. gondii y una semana después se cultivaron in vitro células de ganglios inguinal (GI), mesentérico (GM), toráxico (GT) y de bazo. Luego de la estimulación con ConA, los ratones inmunizados con rTgPI-1 mostraron una respuesta linfoproliferativa T generalizada significativamente mayor comparada con el grupo control sin vacunar en todos los casos analizados, excepto en el GI. Dado que el intestino es la vía de entrada del parásito, se estudió la respuesta inmune a nivel local mediante la medición de citoquinas secretadas por el íleon. Luego de 24 hs de cultivo, se observó en los sobrenadantes un aumento de IFN- y una disminución de IL-10 en los ratones vacunados respecto del grupo control. Estos resultados demuestran que rTgPI-1 administrada bajo este protocolo de prime-boost, es capaz de generar una mayor respuesta del tipo Th1 a nivel intestinal que podría frenar la entrada del parásito, una mayor respuesta T sistémica frente a la infección, y una respuesta humoral con anticuerpos capaces de inhibir la entrada del parásito a la célula.