EFECTO DE LA TEMPERATURA Y LA COMPOSICIÓN DE SOLVENTE SOBRE LAS CONSTANTES DE DISOCIACIÓN DE TAMPONES CROMATOGRÁFICOS COMPATIBLES CON LA DETECCIÓN POR ESPECTROMETRÍA DE MASAS

PADRÓ, JUAN MANUEL; GAGLIARDI, LEONARDO GABRIEL; CASTELLS, CECILIA BEATRIZ

Tucumán

Congreso; XXVII Congreso Argentino de Química - Dr. Pedro José Aymonino; 2008

Asociación Química Argentina

Introducción (Adjunto resumen extendido - trabajo enviado y aceptado)La retención y selectividad de analitos en cromatografía de líquidos usualmente se controla mediante la optimización del pH y de la composición de solvente. Sin embargo, estas variables no son independientes, sino que la composición del solvente modifica el pKa de las sustancias disueltas en él y, en consecuencia, el pH del medio.De la misma manera, la temperatura también puede variar el pKa de las sustancias afectando el pH de las fases móviles cromatográficas y los grados de disociación de los analitos.Los efectos conjuntos de la temperatura y la composición sobre el grado de disociación de los analitos pueden cambiar significativamente la selectividad y la retención cromatográfica. Estos efectos pueden resultar beneficiosos o perjudiciales para la separación, dependiendo de las condiciones experimentales seleccionadas, lo cual requiere estudios sistemáticos de las constantes de disociación de sustancias en función de ambas variables que permitan predecir dichos cambios. Se ha propuesto un modelo para predecir el comportamiento retentivo de analitos ionizables con la temperatura y, en consecuencia, para encontrar la temperatura óptima de una dada separación. Sin embargo, al momento de emplear este modelo para predecir retención se encuentra una seria dificultad, que es la escasez de valores pKa determinados en mezclas hidro-orgánicas metanol/agua y acetonitrilo/agua, a distintas composiciones y temperaturas en las escalas adecuadas, tanto para sustancias usualmente empleadas como buffers como también de analitos.En el estudio de equilibrios ácido-base en mezclas hidro-orgánicas se puede definir el pH (s,w), que es el pH medido en la mezcla de solventes de trabajo con electrodos calibrados en soluciones acuosas o bien el pH (s,s), que es el pH medido en la mezcla de solventes y con electrodos calibrados en el mismo solvente-mezcla. La diferencia entre estos dos valores es el parámetro d. En este trabajo se midieron los valores de pKa de ácido fórmico y trietilamina en acetonitrilo/agua y en el rango de 20 a 60ºC. Las sustancias elegidas son aquellas que se emplean para preparar soluciones reguladoras de pH en cromatografía de líquidos en fase inversa, y en particular aquellas que, por su volatilidad, resultan compatibles con la detección por espectrometría de masas.