Cromatografía líquida multidimensional (Quiral x Aquiral) Desarrollo de un método de análisis simultáneo para la resolución de plaguicidas quirales y aquirales

DÍAZ MERINO, MATÍAS E.; ACQUAVIVA, AGUSTÍN; PADRO JUAN MANUEL; CASTELLS, CECILIA B.

Corrientes Capital (virtual)

Congreso; XI Congreso Argentino de Química Analítica (11 CAQA), Corrientes Capital, Corrientes (virtual); 2021

Asocación Argentina de Químicos Analíticos

Los plaguicidas son utilizados de forma intensiva en la agricultura moderna. Debido a que son peligrosos para la salud humana y el ambiente, es importante controlar los residuos generados después de su aplicación a los distintos alimentos naturales y cultivos durante su desarrollo. Existen estrictas regulaciones sobre límites permitidos para los residuos de plaguicidas en alimentos y en el agua potable en todos los países, incluyendo Argentina1. Aunque aproximadamente el 30% de los plaguicidas registrados actualmente son compuestos quirales, la mayoría de ellos se comercializan como mezclas racémicas2. Los enantiómeros de plaguicidas pueden presentar diferencias en actividad, toxicidad, comportamiento de degradación, metabolismo y biotransformación. Sin embargo, sólo cerca del 7% de los plaguicidas quirales se comercializan como enantiómeros puros o mezclas enriquecidas con uno de sus enantiómeros2.Cromatografía líquida (LC) es una de las técnicas separativas empleada con más frecuencia para el análisis enantioselectivo de plaguicidas. El objetivo de este trabajo ha sido la búsqueda de condiciones separativas de plaguicidas que incluya la posibilidad de lograr no solo la separación de distintos agroquímicos sino también la de enantiómeros de los pesticidas que posean uno (o más) centros quirales. Para esto, son dos los requisitos mínimos: el primero es la inclusión de una columna quiral para lograr la discriminación del mayor número posible de enantiómeros y la segunda es obtener un sistema con una alta capacidad de picos. Los dos requisitos son prácticamente imposibles de lograr con un sistema unidimensional debido a las eficiencias usualmente menores de las columnas quirales respecto de las columnas aquirales de igual dimensión. Por su parte, la LC bidimensional (2D-LC) es una herramienta analítica que permite la separación de múltiples compuestos mediante diversos mecanismos de retención. En la mayoría de los trabajos publicados hasta la fecha involucrando separaciones quirales de distinto tipo de compuestos y/o muestras3, la columna quiral se utiliza en la segunda dimensión (2D) y se realizan principalmente en la modalidad heart-cutting (LC-LC), y específicamente, los ejemplos disponibles en la literatura para la determinación enantiomérica de plaguicidas por 2D-LC son muy escasos3. Recientemente hemos demostrado la potencialidad de la enantioseparación 1D y una separación aquiral en modo inverso (RP) en la segunda dimensión usando la modalidad operativa comprehensive (LCxLC) para el análisis cualitativo de DL aminoácidos en muestras de miel4.En este trabajo se estudió la separación LCxLC de un conjunto de agroquímicos empleando una primer dimensión quiral, relativamente lenta, y una separación aquiral, a alta velocidad, en la segunda dimensión. Se desarrolló una técnica analítica robusta, reproducible y confiable para el análisis de 26 plaguicidas de diversa naturaleza química (17 quirales y 7 aquirales). Para esto, se llevaron a cabo diversos ensayos experimentales analizando individualmente 4 FEQs basadas en polisacáridos derivatizados, con el objetivo de resolver el mayor número de pesticidas quirales dentro del análisis 1D-LC. Con este propósito, se estudiaron variables experimentales tales como: tipo de modificador orgánico (MeOH y ACN) con HClO4 y dietilamina como aditivos, y diferentes gradientes de elución; con cada una de las distintas FEQs.El sistema 2D-LC se conformó con una bomba divisora de flujo activa, y una segunda dimensión extremadamente rápida a alta temperatura, mediante el uso de una columna corta de diámetro interno reducido. En esta segunda dimensión, se optimizaron las condiciones de gradiente usando ACN como modificador orgánico y los mismos aditivos que la 1D con detección de arreglo de diodos (DAD). El presente método QuiralxRPLC se optimizó teniendo en cuenta todos los parámetros que influyen en la capacidad de pico bidimensional: ortogonalidad, frecuencia de muestreo, compatibilidad de las dimensiones, y compatibilidad entre fases móviles en la interfase.https://www.argentina.gob.ar/normativa/nacional/resoluci%C3%B3n-934-2010-177593/actualizacion.Basheer, A. A.. Chirality 2018, 30, 402?406.León-González, M. E., Rosales-Conrado, N., Pérez-Arribas, L. V., Guillén-Casla, V., Biomed. Chromatogr. 2014, 28, 59?83.Acquaviva, A., Siano, G., Quintas, P., Filgueira, M. R., Castells, C. B., J. Chromatogr. A 2020, 1614, 460729.