El receptor HER2 modula el efectoantimitogénico de TGFβ1 en células tumorales adenohipofisarias

PETITI, JP; SOSA, LV; SABATINO M E; GUTIÉRREZ, S; VACA, AM; GARCIA P; DE PAUL, A L; TORRES, A I

Congreso; LVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2013

TGFβ1 induce arresto de células adenohipofisarias tumorales a través de la vía Smad2/3, la cual puede ser regulada por las señalizaciones MAPK y PI3K. Estas vías proliferativas son activadas por el receptor HER2, cuya sobre-expresión ha sido informada en tumores adenohipofisarios. Nuestro objetivo fue determinar si la respuesta anti-proliferativa del TGFβ1/Smad es modulada por HER2 a través de MAPK y PI3K. Cultivos de células GH3B6 y GH4C1 se trataron con TGFβ1 (4ng/ml, 30 min o 24h) sólo o con una pre-incubación de 1 h con los inhibidores: Trastuzumab (HER2, 400 μg/ml), LY294002 (PI3K 10μM) o PD98059 (MEK1/2; 50μM). Se analizó el ciclo celular por citometría de flujo. La interacción de Smad2/3 con ERK1/2 o Akt fue determinada por inmunoprecipitación y posterior Western Blot. La translocación subcelular de Smad2/3, ERK1/2, y Akt fue observada por microscopía confocal y electrónica. Estadística: ANOVA-Fisher. El TGFβ1 indujo arresto en la fase G0/G1, efecto que fue potenciado cuando ambas líneas celulares fueron pre-incubadas con los inhibidores de MEK1/2 y PI3K. En células GH4C1, la co-incubación de TGFβ1/trastuzumab aumentó el efecto anti-proliferativo de ambos factores solos. En células GH3B6 no se observó respuesta al trastuzumab, en coincidencia con la baja expresión de EGFR detectada en esta línea celular comparada con células GH4C1. Los ensayos de inmunoprecipitación mostraron interacción de Smad2/3 con ERK1/2 o Akt. Estas asociaciones fueron incrementadas por TGFβ1, efecto que fue bloqueado luego de la pre-incubación con LY294002 o PD98059. Por microscopía confocal y electrónica se observó co-localización de Smad2/3 con ERK1/2 o Akt. Estos resultados demuestran que el efecto anti-mitogénico de TGFβ1 en células tumorales adenohipofisarias es contrabalanceado por las vías MAPK y PI3K. Además sugieren que el receptor HER2 regularía la proliferación tumoral adenohipofisaria y la señal TGFβ1/Smad2/3, convirtiéndolo en un atractivo blanco terapéutico.