La proliferación de células lactotropas está mediada por la activación de PKC epsilon y ERK1/2

PETITI, JP; DE PAUL, AL; GUTIÉRREZ, S; PALMERI, CM; SOSA, LV; ALVIN G; TORRES, AI

Mar del Plata, Argentina

Congreso; .LII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC).; 2007

En investigaciones previas demostramos que las diferentes isoformas de proteína quinasa C (PKC) modulan el crecimiento hipofisario participando en la proliferación y muerte celular. Nuestro objetivo fue estudiar la activación, translocación subcelular y regulación transcripcional de la PKC epsilon y la implicancia de la vía ERK1/2 en la proliferación de células lactotropas estimuladas con ester de forbol (PMA). Cultivos adenohipofisarios de rata hembra se incubaron con PMA (400 nM, 15min y 3h) sólo o con los siguientes inhibidores: BIM (PKC convencionales y noveles, 4uM; 30min), eV1-2 (PKC epsilon 50 y 100 uM; 30min) y PD98059 (ERK 1/2; 50 y 100 uM; 30min). Se cuantificó la proliferación de lactotropas por inmunomarcación para BrdU/PRL. La activación de PKC epsilon por PMA se determinó en fracción de membrana y citosólica por western blot y su localización subcelular mediante inmunocitoquímica ultraestructural. Los niveles de ARNm de PKC epsilon se evaluaron por PCR. Análisis estadístico: ANOVA-Fisher. La proliferación de lactotropas aumentó un 60% luego del tratamiento con PMA por 15min, mientras que la exposición por 3h la disminuyó significativamente (p< 0.001). La PKC epsilon alcanzó su mayor activación (78%) a los 15 min de estimulación con PMA y sólo un 40 % a las 3 h (p<0.05). Tanto el inhibidor específico de PKC epsilon, como el de las ERK1/2 bloquearon la proliferación inducida por PMA (p<0.001). El tratamiento corto con PMA up-reguló los niveles de ARNm de PKC epsilon, efecto revertido por el inhibidor BIM (p<0.05), sugiriendo una autorregulación transcripcional de esta isoforma. La estimulación con PMA por 15 min indujo una significativa translocación de PKC epsilon al núcleo y complejo de Golgi de lactotropas en comparación a lo observado en células controles. Estos resultados demuestran que la activación de la PKC epsilon y su translocación subcelular inducida por PMA regula la proliferación de células lactotropas a través de la vía MAP quinasa ERK1/2.