LA PROLIFERACIÓN Y PROGRESIÓN DEL CICLO CELULAR DE CÉLULAS ADENOHIPOFISARIAS TUMORALES SON REGULADAS POR LA ACTIVACIÓN DE PKC ALFA, ÉPSILON Y ERK1/2.

PETITI, J. P.; GUTIÉRREZ, S; DE PAUL, A. L.; ANDREOLI, V.; PALMERI, C. M.; SOSA LDEL, V.; BOCCO, J. L.; TORRES, A I

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC).; 2009

La proteína quinasa C (PKC) es una familia integrada por 10 isoformas involucradas en la proliferación y regulación del ciclo celular en células tumorales. Estas funciones son mediadas por vías de transducción de señales, destacándose la vía ERK1/ 2. Nuestro objetivo fue explorar el rol de PKC alfa y épsilon como mediadoras de la proliferación y progresión del ciclo celular de células adenohipofisarias tumorales GH3B6 estimuladas con éster de forbol (PMA) y determinar si estos efectos son dependientes de ERK1/2. Cultivos de células GH3B6 se trataron con PMA (400nM, 15 min) sólo o con los siguientes inhibidores por 30 min: BIM (de PKC convencionales y noveles, 4μM), Gö6976 (de PKCalfa 5μM), eV1-2 (de PKCepsilon 50μM) y PD98059 (de ERK1/2; 50ìM). Se cuantificó la proliferación celular por inmunomarcación para BrdU y el análisis del ciclo celular se realizó por citometría de flujo. La expresión de ERK1/2 se determinó por western blot. La identificación a nivel subcelular de PKC alfa y épsilon se realizó mediante inmunocitoquímica por microscopía confocal (MC) y electrónica (ME). Test estadístico: ANOVA-Fisher. El tratamiento con PMA por 15 min provocó un aumento de la proliferación de células GH3B6 (p<0.001) e incrementó la cantidad de células en la fase S del ciclo celular, efectos que fueron bloqueados por los inhibidores de PKC alfa y épsilon (p<0.001). La incubación con BIM o PD98059 bloqueó la activación de ERK1/2 y la proliferación de células GH3B6 inducida por PMA (p<0.001). La MC y ME revelaron en células controles la presencia de PKC alfa y épsilon en el citosol, mientras que el estímulo con PMA indujo una marcada translocación de estas quinasas a membrana plasmática y nuclear indicando su activación. Estos resultados demuestran que PKC alfa y épsilon, mediante la activación de ERK1/2, cumplen un rol clave en la regulación de la proliferación y progresión del ciclo celular de células tumorales GH3B6, convirtiéndolas en atractivos blancos terapéuticos.