El entorno lipídico modifica la actividad ATPasa de la bomba de calcio de membrana plasmática

MARIA FLORENCIA PIGNATARO; IRENE MANGIALAVORI

Jornada; • 155° Jornada científica de la Academia de Farmacia y Bioquímica; 2011

Academia Nacional de Farmacia y Bioquímica

La bomba de calcio de membrana plasmática (PMCA) es una proteína multirregulada que remueve activamente Ca2+ hacia el medio extracelular. Posee una región en contacto con lípidos con 10 hélices transmembrana y una región citoplasmática donde se encuentran los sitios de interacción con los principales moduladores de la bomba como calmodulina (CaM), fosfolípidos ácidos y ácidos grasos insaturados. El objetivo del presente trabajo es estudiar (1) el impacto de la variación de los lípidos del entorno sobre la actividad ATPasa de la PMCA y (2) la interacción de la misma con el ácido oleico, mediante un análogo fotoactivable (AS86). Los resultados obtenidos muestran que: 1) la actividad Ca2+ ATPasa es 30% menor cuando se pone en contacto a la proteína con dioleilfosfatidilcolina o con lípidos extraídos de la membrana de glóbulo rojo, con respecto a la incubación con dimiristoilfosfatidilcolina. 2) los valores de K0.5 obtenidos para cada lípido resultaron similares (0.006 nmol/µl) 3) El AS86 presenta un comportamiento dual, cuando interacciona no covalentemente activa la enzima como el ácido oleico, mientras que su unión covalente produce la inhibición de la activación por CaM a bajas concentraciones y afecta la actividad basal de la bomba a concentraciones mayores. Esto muestra como la composición de los lípidos circundantes a una proteína de membrana puede modificar su estructura y su función.