INVESTIGADORES
MORGAN Patricio Eduardo
congresos y reuniones científicas
Título:
El silenciamiento del receptor de mineralocorticoides (MR) del miocardio cancela la segunda fase de fuerza (SFF) post-estiramiento
Autor/es:
DÍAZ RG, VILLA-ABRILLE MC, ENNIS IL, MORGAN PE, CINGOLANI HE, PÉREZ NG
Lugar:
Rosario
Reunión:
Congreso; Reunion Cientifica Anual Sociedad Argentina de Fisiología; 2012
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Fisiología
Resumen:
El
estiramiento del miocardio provoca un aumento rápido de fuerza contráctil seguido
por una fase lenta o SFF que se debe a un aumento del Ca2+
intracelular. Aunque la causa del aumento de Ca2+ se discute,
nosotros hemos propuesto que un mecanismo autocrino/paracrino de activación del
intercambiador Na+/H+ miocárdico (NHE1) por quinasas
redox-sensibles sería clave. Además, usando herramientas farmacológicas, hemos
propuesto que la activación del MR sería parte de la cadena de eventos disparada
por el estiramiento y que conduce a la SFF. Sin embargo, la especificidad de los
inhibidores farmacológicos del MR spironolactona y eplerenona ha sido
cuestionada. Más aún, un trabajo reciente en músculo liso ha alertado que estos
compuestos pueden afectar rutas de señalización que no dependen de la
activación del MR. El objetivo de este trabajo fue testear específicamente el
rol del MR en la SFF. Para ello diseñamos un RNA de interferencia capaz de
silenciar específicamente al MR y lo incorporamos a un vector lentiviral
(l-shMR), el que fue luego inyectado en la pared ventricular izquierda de ratas
Wistar. Otro grupo de ratas inyectadas con un vector que expresaba una
secuencia no-silenciadora (scramble, ?Scr?) del MR sirvió de control. Luego de
1 mes se midió la expresión del MR en ventrículo izquierdo y se evaluó en
músculos papilares aislados la SFF, así como los cambios post-estiramiento del pHi
(por activación del NHE1 en medio libre de bicarbonato) y de la fosforilación
de quinasas redox-sensibles (ERK1/2). Los corazones con l-shMR mostraron una reducción significativa
de la expresión proteica del MR (100 ± 5.9 % n=8, Scr vs. 57 ± 5.8 % n=9, l-shMR, P<0.05) y
cancelación tanto de la SFF (en % del aumento rápido inicial: 125.9 ± 1.8 n=8, Scr,
vs. 103.9 ± 1.3 n=8, l-shMR,
P<0.05) como del aumento del pHi disparado por el estiramiento (cambio
de pHi: 0.156 ± 0.025 n=7, Scr, vs.
0.009 ± 0.015 n=10, l-shMR, P<0.05). Además, el estiramiento produjo un
aumento de la fosforilación de ERK1/2 que fue significativamente reducido por
el l-shMR (en % del control no estirado: 149.6 ± 9.9 n=6, Scr vs. 121.2 ± 5.6 n=7, l-shMR,
P<0.05). Los resultados obtenidos proveen evidencia
suficiente para proponer que la activación del MR es crucial en el mecanismo
autocrino/paracrino disparado por el estiramiento que conduce a la activación
del NHE1 y al consecuente desarrollo de la SFF.