Modificación de análogos de lactosa con polietilenglicol (PEG) para estudios de inhibición de Trans-sialidasa de T.cruzi

GIORGI, M.E.; RATIER, L.; AGUSTI, R.; FRASCH, A.C.C.; LEDERKREMER, R.M.

Mendoza

Congreso; XVII Simposio Nacional de Química Orgánica; 2009

Sociedad Argentina de Investigación en Química Orgánica

La trans-sialidasa de Trypanosoma cruzi (TcTS) cataliza la transferencia de ácido siálico, unido a(2→3) a unidades de galactopiranosas terminales presentes en glicoconjugados  del huesped al oxhidrilo del C-3 de b-galactopiranosas de la superficie del parásito. Esta enzima no tiene equivalente en mamíferos y por lo tanto es un buen blanco para el diseño de inhibidores con fines quimioterapéuticos. En trabajos anteriores determinamos que análogos de lactosa son buenos inhibidores de TcTS pero ensayos in vivo mostraron que poseen corta vida media en sangre. La modificación de moléculas biológicas por conjugación con polietilenglicol (PEG) ha sido utilizada para aumentar la vida media y estabilidad de péptidos. Sin embargo, hay muy pocos trabajos sobre pegilación de carbohidratos. Presentamos ahora la pegilación del disacárido bencil b-D-Galp(1→6)-a-D-GlcNH2 (1). Este disacárido es aceptor en la rección de trans-sialidación e inhibidor competitivo cuando se usa sialillactosa como donor de siálico y N-acetillactosamina como aceptor. La pegilación se realizó por amidación del grupo 2-amino del disacárido 1 con metoxi-PEG activado como ester de succinimidilo (MeO-PEGNHS-ester) (Esquema). Se utilizaron dos derivados de PEG, uno que introduce 12 grupos oxietileno y un PEG polidisperso de peso molecular 5000 (NHS-PEG 5000). La reacción se llevó a cabo en buffer  a temperatura ambiente y el producto se  purificó en columna de fase reversa obteniéndose un 60% de rendimiento. Los espectros de RMN,  MALDI-TOF y ESI indicaron pegilación con un equivalente de PEG. Con los derivados obtenidos se realizaron ensayos de inhibición de la reacción de trans-sialidación y estos fueron analizados por HPAEC-PAD y TIA. Ambos derivados resultaron buenos inhibidores mostrando valores comparables a los análogos de lactosa previamente estudiados.