Participación del Sistema Colinérgico en el Proceso Apoptótico de Células Acinares Glandulares Humanas. Rol de Anticuerpos Anti-muscarínicos del Síndrome de Sjögren

SILVIA REINA, LEONOR STEIN-BORDA, ENRI BORDA

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; LV Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Investigaion Clinica; 2010

Sociedad Argentina de Investigacion Clinica

El tejido epitelial está involucrado en los mecanismos inmunológicos de tolerancia y de mantenimiento frente a auto-antígenos y es el blanco principal en el Síndorme de Sjögren primario (SSp). La alteración de su función puede estar involucrada en el desarrollo y/o mantenimiento de reacciones autoinmunes crónicas. En el SSp está descripto un incremento del fenómeno apoptótico (FA) en el tejido epitelial tanto acinar como ductal. El objetivo de este trabajo fue investigar si las IgG séricas anti receptor muscarínico (mAChR) subtipo M3 (IgG-M3) de sueros de pacientes con SSp disparan el FA en células acinares humanas (A-253). Asimismo, analizaremos la participación del AMP cíclico (AMPc) y de la prostaglandina E2 (PGE2) en este fenómeno.  Utilizando técnicas de transferencia terminal de deoxidonucleótidos (TUNEL) y fragmentación del ADN determinaremos el FA. La producción de AMPc y PGE2, serán analizadas por ensayos de ELISA. La IgG anti-péptido M3 (IgG-M3), purificada por afinidad en presencia del péptido sintético correspondiente al 2do dominio extracelular del mAChR humano fue capaz de incrementar el FA en las células A-253 [media±ESM] IgG-M3 60±0.5,n=8; IgG normal: 10±0.08,n=7; y la fracción no anti-péptido (eluato): 7±1,n=7. Los efectos de la IgG-M3 fueron antagonizados por el J104129 4.5×10–9 M (antagonista mAChR M3). Por otro lado, la IgG-M3 incrementó la producción de AMPc (IgG normal: 1.3±0.01, n=6; IgG-M3:9.5±0.8, n=6), como así también la producción de PGE2 (IgG normal:10±1,n=6; IgG-M3:65±1.5,n=7). Tanto el J104129 como el péptido sintético sintético M3 (10μg/ml) inhibieron el incremento en la producción de AMPc (2.4±0.2,n=6) y de PGE2 (26±2,n=5), respectivamente. Nuestros resultados sugieren que las IgG-M3 presentes en el suero de pacientes con SSp tienen la capacidad de incrementar el FA en las células epiteliales glandulares humanas con la participación del AMPc y de moléculas proinflamatorias, como la PGE2.