Rol de la proteína TbRRM1 en la regulación de la transcripción dependiente de la RNA Pol II en Trypanosoma brucei.

NÍTTOLO, ANALÍA; LEVY, GABRIELA; BAÑUELOS, CAROLINA; DANIEL O SANCHEZ; TEKIEL, VALERIA

Bs As

Workshop; Workshop de Biología Celular y Molecular del ARN.; 2018

Workshop de Biología Celular y Molecular del ARN.

TbRRM1 es una proteína de unión a RNA esencial de T. brucei. Estudios previos de nuestro laboratorio indicaron que su silenciamiento por RNAi genera el bloqueo del ciclo celular y la muerte de los parásitos mediante un mecanismo de tipo apoptótico. Recientemente, se ha visto que TbRRM1 se encuentra asociada a numerosos mRNAs e histonas, infiriendo que tendría algún rol en la regulación a nivel transcripcional y post-transcripcional.Para determinar si la proteína TbRRM1 está involucrada en el proceso de trans-splicing, evaluamos los niveles del SL-RNA por RTqPCR. Observamos un aumento de los niveles del SL-RNA luego de la inducción del RNAi. Sin embargo, la eficiencia del trans-splicing no se vio afectada, lo que sugiere una alteración a nivel transcripcional. Además, mediante la técnica de Run-on, determinamos que el silenciamiento de TbRRM1 produce una disminución global de la transcripción. Asimismo, los análisis de la transcripción de genes dependientes de la RNA Pol II pertenecientes a una misma unidad de transcripción policistrónica (PTU), sugirieron que TbRRM1 sería necesaria para la elongación de la transcripción. Por otro lado, la transcripción del SL-RNA aumentó en parásitos depletados de TbRRM1.En resumen, nuestros datos muestran que TbRRM1 tendría un rol dual: facilitaría la elongación de la transcripción de las PTUs, y actuaría reprimiendo la expresión de las unidades monocistrónicas de los genes del SL-RNA, ambos procesos mediados por la RNA Pol II.