Capacitación el cultivo celular y metodología STE (Short Term Exposure, OCED TG 491) para evaluación de daño ocular.

GUTIÉRREZ, MARÍA LAURA; RIVERO, MARTIN NICOLAS; IZAGUIRRE, MERCEDES; LENZE, MARIELA

2020-02-01

2020-02-01

Salud humana

Programa Día 1. Teórico. Bioseguridad en el Laboratorio de Cultivos Celulares. Introducción a los Cultivos Celulares.Práctico. Entrenamiento de Bioseguridad en el Laboratorio de Cultivo Celular.Día 2. Teórico. IATA para la identificación de daño ocular severo y potencial de irritación de substancias. OECD 263.OECD TG 491 - Short Time Exposure In Vitro Test Method, principio del ensayo, limitaciones, controles internos de aceptación; resultados esperados, interpretación de los datos.Práctico. TG OECD 491.Preparación de medio de cultivo. Descongelamiento de células SIRC. Plaqueo y repique para expansión de la línea. Observación al Microscopio Óptico de diferentes líneas celulares.Día 3. Teórico. Abordajes de prácticas integradas para evaluación de seguridad ocular de productos. Sustancias controles y para demostración de competencia metodológica. Diseño experimental de la placa de 96 wells. Preparación a utilizar en el ensayo.Práctico. Tripsinización, análisis de viabilidad por azul de tripan y conteo de células SIRC. Plaqueo en 96 wells.Día 4. Práctico. Preparación de la solución de MTT. Tratamiento de las células SIRC en placa de 96 wells. Ensayo de viabilidad celular. Medición de absorbancia en espectrofotómetro.Día 5. Teórico-Práctico. Análisis de los datos obtenidos. Criterios de aceptación. Clasificación de las substancias. Confección de la tabla con los resultados analizados.Refuerzo de prácticas que no hayan sido realizadas satisfactoriamente o que los participantes consideren necesarias.