ENSAYO HET-CAM PARA EVALUACIÓN DE IRRITACIÓN OCULAR DE UN COLIRIO CON BENZOCAÍNA

RIVERO, MARTIN NICOLAS; SILVIA WIKINSKI; GUTIÉRREZ, MARÍA LAURA

2022-06-01

2022-07-01

Sanidad animal

El presente estudio se realizó a pedido de la empresa LABYES S.A., con el objetivo de determinar el potencial irritación ocular producido por dos concentraciones de benzocaína contenida en colirios, mediante la metodología HET-CAM.Se utilizó la metodología HET-CAM (Hen?s Egg Test-Chorioallantoic Membrane), la cual es frecuentemente empleada como método alternativo al uso de animales de experimentación para predecir el potencial de irritación ocular.Este método permite visualizar reacciones características de la irritación como hemorragia, lisis vascular, coagulación e hiperemia. Estos fenómenos pueden ser observados en la membrana corioalantoidea (CAM) de huevos de gallina fecundados, de siete a nueve días de desarrollo, cuando el sistema nervioso periférico aún no está desarrollado, por lo que no hay percepción de dolor (Aleksandrowicz and Herr, 2015; Rosenbruch, 1997).Fueron evaluados 2 colirios de Benzocaína en aceite de ricino a dos concentraciones, 2% y 20%. Además, se evaluó aceite de ricino como control vehículo.El aceite de ricino y la benzocaína al 2% se encontraban en forma líquida y transparente, por lo cual permitieron la observación de la CAM durante los 300 segundos del ensayo. La benzocaína al 20% se encontraba cristalizada, por lo cual se calentó previo a su ensayo para aumentar su solubilidad y transparencia. Debido a las características físicas de los productos, se utilizó el protocolo de ECVAM N° 96, donde la sustancia es aplicada y se continúa con la observación de la CAM por 5 minutos. Se analizó el tiempo de aparición de los fenómenos de hemorragia, lisis y coagulación.Los tres productos en estudio (aceite de ricino, benzocaína al 2% en aceite de ricino y benzocaína al 20% en aceite de ricino) resultaron ser no irritantes por el protocolo de HET-CAM empleado.