INTEGRACIÓN DE METODOLOGÍAS IN VITRO PARA OPTIMIZAR LA PREDICCIÓN DEL NIVEL DE IRRITACIÓN OCULAR DE PRODUCTOS COSMÉTICOS.

RESCHINI, AGUSTINA; LENZE, MARIELA; RIVERO, MARTIN NICOLAS; BENEDETTI, MARTINA; WIKINSKI, SILVIA; GUTIÉRREZ, MARÍA LAURA

Quilmes

Jornada; IV Jornadas de Investigadores en Formación en Ciencia y Tecnología, Universidad Nacional de Quilmes; 2021

Universidad de Quilmes

Los ensayos de toxicidad forman parte del proceso de desarrollo, aprobación y registro de medicamentos, agroquímicos, domisanitarios y sustancias cosméticas. Según la disposición 345/06 de ANMAT, se requieren estudios de irritación ocular para la aprobación de productos de Grado II, aquellos que son aplicados en el área ocular (champús, cremas para el área facial, protectores solares, entre otros). Actualmente, en nuestro país el ensayo utilizado para predecir irritación y corrosión ocular en estos productos es el test de Draize, que emplea conejos como especie experimental. Sin embargo, el mismo presenta algunas limitaciones, como su baja reproducibilidad, las diferencias anatómicas presentes entre el ojo de conejo y el ojo humano y el empleo de animales vivos. La Comunidad Económica Europea (CEE) ha fomentado el desarrollo de métodos alternativos (MA) a los ensayos in vivo bajo el contexto de las 3Rs (Reemplazo, Reducción y Refinamiento) y ha proporcionado un marco regulador para la eliminación progresiva de la experimentación con animales en el testeo de productos cosméticos. Desde el año 2013, en la CEE rige la prohibición de comercializar materia prima y productos cosméticos terminados que hayan sido testeados en animales. Además, el reemplazo de animales de laboratorios por MA está imponiéndose en muchos países, siendo Brasil uno de ellos.Entre los MA validados más utilizados para reemplazar el test de Draize se encuentran el método HET-CAM (ensayo en la membrana corioalantoidea de huevos de gallina), y los ensayos de citotoxicidad realizados en líneas celulares de fibroblasto y de córnea. El ensayo de HET-CAM posee una alta capacidad de predicción para productos que no son irritantes, pero aquellos productos que contienen surfactantes iónicos pueden generar falsos positivos. El objetivo del presente proyecto es establecer una estrategia intra-laboratorio que resulte complementaria a la metodología HET-CAM, implementando estudios de citotoxicidad. Para ello, se ensayarán 18 productos cosméticos, previamente testeados por HET-CAM, por dos métodos: 1. Ensayo de exposición breve (STE) realizado a partir de un cultivo celular de córnea de conejo y 2. Ensayo de citotoxicidad por recaptación de rojo neutro (NRU), realizado a partir de un cultivo celular de fibroblastos murinos. El plan de trabajo propuesto permitirá conocer y comparar el alcance de dos metodologías in vitro utilizadas para la evaluación de irritación ocular de productos cosméticos, para sustituir así a los ensayos in vivo. Específicamente, se espera que, con al menos uno de los ensayos de citotoxicidad propuestos, aumente el poder de predicción de irritación ocular en productos cosméticos conteniendo surfactantes.