Efectos de Enterococcus faecalis CECT7121 sobre basófilos de pacientes alérgicos, comparados con los de decocción de flores de Achycrocline satureioides y bromuro de ipatropio + salbutamol

MALDONADO AM; ALANIZ FS; CARIDDI LN; MANGHI MA; CASTRO MS; ANDRADA M; MOSER M; MAZZARINI L

Hotel Intercontinental, Buenos Aires

Congreso; XXXII Congreso Anual de la Asociación Argentina de Alergia e Inmunología Clínica y Capítulo Regional de INTERASMA; 2008

Asociación Argentina de Alergia e Inmunología Clínica

Antecedentes y objetivos. En estudios previos se comprobó que Enterococcus faecalis CECT 7121 (Ef), cepa ambiental probióica, tenía efectos adyuvantes e inmunomoduladores pro-Th 1. Se vio que las células mononucleares de animales tratados con Ef incrementaron la proliferaración de esplenocitos y la síntesis de IFN-g, IL-6, IL-12 e IL-10. Ef tuvo efecto antiproliferativo sobre células de linfoma e indujo apoptosis de céulas tumorales. Se demostró que la decocción de flores (DF) de Achyrocline satureioides (As) presentaba in vitro propiedades antialérgicas y linfoproliferativas. Nuestro objetivo fue investigar los efectos de Ef sobre la desgranulación de basófilos desafiados con el alergeno específico y compararlos con los de DF y bromuro de ipratropio + salbutamol. Materiales y métodos. Se estudiaron 24 individuos alérgicos de 2 a 30 años. Se identificaron los alergenos principales por prick y por la prueba de liberación de la enzima B-hexosaminidasa (B-H) proveniente de la desgranulación de bassófilos desafiados con el principal alergeno en cada caso. Se investigó si Ef inhibió la liberación de B-H, y en tal caso, si los efectos inhibitorios eran comparables a los de Df o bromuro de ipratropio + salbutamol. El dosaje B-H liberada, se realizó según Shibata H et al 1996. Los bassófilos de cada paciente fueron separados con dextrán 70 al 6% y NaCl al 0,9% y enfrentados al alergeno: solo (100 PNU/ml); o adicionado de Ef (1,39 ﾗ 10–9 μg/ml), o de DF de As (75 μg/ml); o de bromuro de ipratropio + salbutamol (0,05 mg/ml + 0,3 mg/ml). Para calcular los niveles de B-H liberada se aplicaron las fórmulas de Na HJ et al. (2002): a) Porcentaje de liberación de B-H = (DO de B-H liberada con alergeno – DO de B-H liberada sin alergeno) x 100 / (DO de B-H liberada con alergeno); y b) Porcentaje de inhibición de liberación de B-H = (DO de B-H liberada con alergeno – DO de B-H liberada con Alergeno + Ef o + DF o bromuro de ipratropio + salbutamol) x 100 / (DO de B-H liberada con alergeno). Los valores se expresaron como promedio +/-  desvío estándar. Los parámetros fueron comparados utilizando el programa GraphPad Prism versión 4.0 software (Inc. San Diego, USA, 2004) y evaluados por la prueba de la t-Student para muestras apareadas. Se consideró significativa la diferencia de p < 0,05.Resultados. Los basófilos desafiados con el alergeno específi co liberaron altos índices de B-H respecto a las céulas sin estíulo alergico, p < 0,0001. La liberación de B-H fue inhibida por Ef: p < 0,05, DF: p<0,01, y bromuro de ipratropio + salbutamol: p<0.01. Conclusiones. Se corroboraron las propiedades antialérgicas in vitro de DF, que fueron similares a bromuro de ipratropio + salbutamol. Bajas dosis de Ef mostraron in vitro efectos inhibidores de la desgranulación alergeno específi ca. Los resultados de Ef fueron promisorios, pero menos signifi cativos que los de los compuestos comparados.En estudios previos se comprobó que Enterococcus faecalis CECT 7121 (Ef), cepa ambiental probióica, tenía efectos adyuvantes e inmunomoduladores pro-Th 1. Se vio que las células mononucleares de animales tratados con Ef incrementaron la proliferaración de esplenocitos y la síntesis de IFN-g, IL-6, IL-12 e IL-10. Ef tuvo efecto antiproliferativo sobre células de linfoma e indujo apoptosis de céulas tumorales. Se demostró que la decocción de flores (DF) de Achyrocline satureioides (As) presentaba in vitro propiedades antialérgicas y linfoproliferativas. Nuestro objetivo fue investigar los efectos de Ef sobre la desgranulación de basófilos desafiados con el alergeno específico y compararlos con los de DF y bromuro de ipratropio + salbutamol. Materiales y métodos. Se estudiaron 24 individuos alérgicos de 2 a 30 años. Se identificaron los alergenos principales por prick y por la prueba de liberación de la enzima B-hexosaminidasa (B-H) proveniente de la desgranulación de bassófilos desafiados con el principal alergeno en cada caso. Se investigó si Ef inhibió la liberación de B-H, y en tal caso, si los efectos inhibitorios eran comparables a los de Df o bromuro de ipratropio + salbutamol. El dosaje B-H liberada, se realizó según Shibata H et al 1996. Los bassófilos de cada paciente fueron separados con dextrán 70 al 6% y NaCl al 0,9% y enfrentados al alergeno: solo (100 PNU/ml); o adicionado de Ef (1,39 ﾗ 10–9 μg/ml), o de DF de As (75 μg/ml); o de bromuro de ipratropio + salbutamol (0,05 mg/ml + 0,3 mg/ml). Para calcular los niveles de B-H liberada se aplicaron las fórmulas de Na HJ et al. (2002): a) Porcentaje de liberación de B-H = (DO de B-H liberada con alergeno – DO de B-H liberada sin alergeno) x 100 / (DO de B-H liberada con alergeno); y b) Porcentaje de inhibición de liberación de B-H = (DO de B-H liberada con alergeno – DO de B-H liberada con Alergeno + Ef o + DF o bromuro de ipratropio + salbutamol) x 100 / (DO de B-H liberada con alergeno). Los valores se expresaron como promedio +/-  desvío estándar. Los parámetros fueron comparados utilizando el programa GraphPad Prism versión 4.0 software (Inc. San Diego, USA, 2004) y evaluados por la prueba de la t-Student para muestras apareadas. Se consideró significativa la diferencia de p < 0,05.Resultados. Los basófilos desafiados con el alergeno específi co liberaron altos índices de B-H respecto a las céulas sin estíulo alergico, p < 0,0001. La liberación de B-H fue inhibida por Ef: p < 0,05, DF: p<0,01, y bromuro de ipratropio + salbutamol: p<0.01. Conclusiones. Se corroboraron las propiedades antialérgicas in vitro de DF, que fueron similares a bromuro de ipratropio + salbutamol. Bajas dosis de Ef mostraron in vitro efectos inhibidores de la desgranulación alergeno específi ca. Los resultados de Ef fueron promisorios, pero menos signifi cativos que los de los compuestos comparados.