Complejo de Proteínas Retrómero: primer aproximación al reciclado de receptores en Giardia lamblia

MIRAS S.L.; GOTTIG N; ROPOLO A.S.; TOUZ M. C.

Congreso; XXVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología.; 2013

El retrómero es un complejo proteico pentamérico, que media el transporte retrógrado de los receptores de hidrolasas ácidas entre endosomas y la red trans-Golgi y se conserva en todos los eucariotas. A diferencia de otros eucariotas, el sistema de endomembranas del trofozoíto de Giardia es simple y se compone de retículo endoplasmático (ER) y vesículas periféricas (PVs), las cuales representarían una convergencia de sistemas tales como los endosomas y lisosomas. Se ha descrito, a la clasificación y el tráfico de proteínas de membrana e hidrolasas solubles, desde el retículo endoplásmico a las PVs, como un mecanismo específico y conservado. No obstante, hasta el momento se desconoce si el Complejo de proteínas Retrómero de Giardia participa en el reciclaje de los receptores. Se han identificado en este parásito los homólogos de la proteína de clasificación vacuolar del retrómero (Vps35p, Vps26p, y Vps29p). El clonado de la subunidad GlVPS35 y la producción de antisuero dirigido contra la misma, permitió la localización de esta proteína en las PVs, así como en el citosol. También expresión de las subunidades, GlVPS26, y GlVPS29 como proteínas de fusión con el tag HA en el extremo C-terminal, se utilizó para demostrar su asociación con membranas, y microscopía láser confocal e inmunofluorescencia reveló un alto grado de colocalización entre las subunidades del retrómero y también con marcadores del retículo endoplasmático y las PVs. Por otro lado, datos de interacción proteína-proteína revelaron asociación entre las subunidades y GlVPS35 y de esta con el dominio citosólico del receptor de hidrolasa GlVps. En conjunto, nuestros datos proporcionan información original de las interacciones moleculares que median el ensamblaje del subcomplejo retromerico de selección del cargo y su participación en el reciclaje del receptor de hidrolasas ácidas en este parásito.