Efecto inhibitorio de lactobacilos sobre crecimiento y la producción de biofilm de cepas de Klebsiella asociadas a catéter

SILVA C; MALDONADO MC; NADER ME; CECILIA M

Tafí del Valle

Jornada; XXII Jornadas Científicas. Asociación de Biología de Tucumán; 2005

Asociación de Biología de Tucumán

Las infecciones relacionadas con catéteres y otros dispositivos son un verdadero desafío para la prevención y el tratamiento; las terapias no siempre son efectivas debido a los nuevos mecanismos de virulencia desarrollados por los microorganismos; entre ellos la formación de biofilm que es la acumulación de microorganismos y sus productos extracelulares formando una estructura compleja sobre una superficie. Las infecciones asociadas a catéter alcanzan un 40% entre todas las infecciones nosocomiales y son la fuente más común de bacteriemias por Gram negativos en pacientes hospitalizados. Para evitar las infecciones asociadas a catéter se aplicaron numerosas y variadas innovaciones tecnológicas: usando lubricantes anti infecciosos, drogas antimicrobianas, modificando materiales del catéter sin lograr resultados positivos. Numerosas investigaciones demuestran el efecto protector que ejercen las bacterias lácticas frente a diversas infecciones; ellas actúan por sí mismas o a través de sus metabolitos mediante diversas estrategias y mecanismos. Actualmente muchas de ellas se usan para prevenir y tratar infecciones clínicas. Por ello en la búsqueda del desarrollo de estrategias efectivas tanto preventivas como terapéuticas el Objetivo de este trabajo fue: estudiar en Klebsiella aislada de catéteres la inhibición del crecimiento y la formación de biofilm por bacterias del género LactobacillusMaterial y métodos: Cepas bacterianas a) 4 cepas de Klebsiella pneumoniae subsp pneumoniae con alta capacidad de formar biofilm, activadas en caldo Luria por 12 hs, homogeniezadas y con reposo de 15 min. b) 1 cepa de lactobacilo sp. Activa cultivada por 12 hs en caldo MRS (Rogosa), centrifugada, separándose el sobrenadante en dos partes una se neutralizó con NaOH 8N y la otra se mantuvo con pH ácido; el pellet se dividió en dos partes una se lavó con solución fisiológica y la otra quedó sin lavar. Estudio de inhibición los ensayos se efectuaron en una policubeta estéril. Se colocó en los pocillos 150 y 100 ml de cada una de las cepas de Klebsiella y se completó hasta un volumen final de 200 ml con células enteras de lactobacilos lavadas y sin lavar y sobrenadante ácido y neutro. Las placas se incubaron a 37ºC por 4 hs. Para el estudio de la producción de biofilm se siguió la técnica de O´Toole mediante lecturas de la densidad óptica (DO). A menor producción de biofilm menor DO. Recuento bacteriano se efectuaron en medios selectivos y diferenciales al comienzo y al final de cada una de las experiencias. Klebsiella disminuyó entre 3 y 7 log en el crecimiento y sobre la producción de biofilm una disminución de 5 a 11 veces en la DO. Conclusión: la inhibición de la formación de biofilm y el crecimiento de cepas de Klebsiella por lactobacilo y su sobrenadante ácido y neutro podría significar un método alternativo, práctico y económico para la prevención de infecciones por bacterias asociadas a catéteres e incentiva a acentuar los estudios como terapia preventiva y así evitar el incremento de cepas resistentes a los antimicrobianos.