La expresión génica de HO-1 no esta restringida epigeneticamente y requiere factores de transcripcion relacionados a estrés en plantas de soja sometidas a radiación ultravioleta-B

SANTA CRUZ, DM; PACIENZA, N; ZILLI, CG; PAGANO, EA; BALESTRASSE, KB; YANNARELLI, GG

Congreso; XI Reunion del Grupo Español de Investigacion en Radicales Libre (GEIRLI); 2016

La enzima Hemooxigenasa-1 (HO-1) juega un rol protector frente al estrés oxidativo enplantas. Sin embargo, los mecanismos que regulan su expresión génica han sido pocoestudiados. En el presente trabajo investigamos el estado de metilación de una región ricaen CG del promotor de HO-1 y la expresión de factores de transcripción (TFs) en plantasde soja sometidas a estrés por radiación ultravioleta-B (UV-B). El ADN genómico y elARN total fue aislado de hojas de plantas irradiadas con 7.5 y 15 kJ.m-2 UV-B. El ADNfue tratado con bisulfito de sodio y una región promotora de 304 pares de bases fueamplificada mediante PCR, clonada en un vector plasmídico pGEM-T y analizada porsecuenciación de ADN. El análisis de la secuenciación mostró niveles de metilación delpromotor de HO-1 similares en plantas control y tratadas con las diferentes dosis de UV-B(C: 3.0±0.6%; 7.5: 3.14±0.5%; 15: 2.9±0.5%). Es interesante notar que el promotor de HO-1 se encontró fuertemente demetilado en el grupo control. Posteriormente, se estudiómediante RT-PCR cuantitativa la expresión génica de un grupo de TFs relacionados aestrés por calor, sequía y salinidad pero no habían sido estudiados frente a estrés porradiación UV-B (GmMYB177, GmMYBJ6, GmWRKY21 y GmWRK13). Se observó quelos tres primeros responden a estrés por UV-B y mediarían la sobre-expresión de HO-1. Enconjunto, estos resultados demuestran que la HO-1 no estaría regulada de una maneraepigenética. Más aun, los bajos niveles de metilación del promotor sugieren que estaenzima puede responder rápidamente a fin de paliar el estrés ambiental. Finalmente, estetrabajo permitió identificar algunos TFs involucrados en la sobre-expresión de HO-1 enrespuesta a la radiación UV-B.