Expresión y localización de sitios de reconocimiento para la zona pelúcida en espermatozoides humanos bajo condiciones capacitantes

ROSANO, GERMÁN L.; MUNUCE, MARÍA J

Rosario, Argentina

Congreso; VI Congreso y XXIV Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2004

Sociedad de Biología de Rosario

El reconocimiento y unión espermatozoide - ovocito implica la unión específica de receptores para carbohidratos presentes en la cabeza de las células espermáticas a cadenas complementarias de oligosacáridos de la zona pelúcida (ZP) ovocitaria. Nuestro objetivo fue estudiar la presencia y localización de sitios de unión para D-manosa (RM) en espermatozoides humanos bajo condiciones capacitantes y su asociación con el estado acrosomal. La detección del RM se realizó incubando los espermatozoides con una  neoglicoproteína de D-manosa unida a albúmina (BSA) y fluoresceína (FITC). La localización del RM fue visualizada por microscopía de epifluorescencia a 100x y microscopía confocal láser a 63x. La presencia del RM fue evaluada en espermatozoides incubados en medio capacitante a tiempo 0, 4 y 22 h. La asociación entre el RM y el estado acrosomal se observó por doble tinción con la aglutinina de Pisum sativum unida a rodamina y la neoglicoproteína con FITC a 100x. Los datos se muestran como media ± SEM analizados por ANOVA y Tukey-Kramer. Por microscopía de epifluorescencia que existen tres patrones RM: I, inespecífico; II, región acrosomal y III, segmento ecuatorial. Por análisis serial confocal se distingue que el patrón II y III muestran una distribución de marca fluorescente asociada a la membrana plasmática. EL % II + III aumentó durante la capacitación (0 h: 14.0 ± 2.3 vs. 4 h: 26.9 ± 3.2* vs. 22 hs: 37.6 ± 4.4%*, *p