INVESTIGADORES
ROSANO German Leandro
congresos y reuniones científicas
Título:
CARACTERIZACIÓN MOLECULAR DE CHAPERONES CLOROPLASTICOS DEL TIPO Hsp100 DE Arabidopsis thaliana
Autor/es:
ROSANO, G.L.; CECCARELLI, E.A
Lugar:
Huerta Grande, Argentina
Reunión:
Otro; Reunión Conjunta de Sociedades de Biología de la República Argentina; 2007
Institución organizadora:
Sociedades de Biología de la República Argentina
Resumen:
En cloroplastos de A. thaliana se han identificado chaperones de la familia Hsp100, conformada por tres miembros: ClpC1, ClpC2 y ClpD. Estas proteínas llevarían a cabo diversos roles como asistir en el plegado, mantenimiento e importe de proteínas cloroplásticas. Los objetivos de este trabajo son obtener en forma recombinante los chaperones y estudiar su función in vitro. Los cADN se obtuvieron del banco de cADN de A. thaliana RIKEN, se amplificaron por PCR y se clonaron en el vector de expresión pET28a. ClpC2 y ClpD fueron expresadas y purificadas a homogeneidad por cromatografía de afinidad con resina de níquel-NTA-agarosa. En estudios cinéticos, se estableció su actividad ATPasa basal y en función del pH y cationes divalentes, así como estimulación en presencia de péptidos de estructura desordenada. Por su parte, no se logró la expresión de ClpC1 ya que causa crecimiento retardado y muerte celular al huésped de expresión, lo cual se evidenció por experimentos de curva de crecimiento y conteo de células viables en placa
