Incorporación de Inmunofluorescencia indirecta en el algoritmo diagnóstico de HTLV-1/2. Resolución de los perfiles indeterminados por Western blot

BALLANGERO M, BERINI C, GASTALDELLO R, MANGANO A, BARBAS MG, SEN L, BIGLIONE M, GALLEGO S

Buenos Aires

Congreso; VIII Congreso Argentino de Virología; 2005

Asociación Argentina de Microbiología

Los resultados indeterminados por Western blot para determinar la presencia de anticuerpos para HTLV-I/II son frecuentes en todo el mundo, tanto en regiones endémicas como en regiones no endémicas y generan incertidumbre en el diagnóstico. En este sentido, cuando un individuo resulta indeterminado por WB, es necesario hacer un seguimiento para resolver el diagnóstico. La mayoría de los donantes de sangre con perfiles indeterminados en regiones no endémicas resultan ser negativos para la infección, y un porcentaje de ellos, presenta resultados indeterminados persistentes. En el presente estudio se evaluó una inmunofluorescencia indirecta (IFI) “in house”  como técnica complementaria en el algoritmo diagnóstico de HTLV-I/II, para confirmar la infección en muestras indeterminadas por WB. Se realizó la determinación de  anticuerpos anti-HTLV-I/II por IFI, para lo cual se  utilizaron las líneas celulares MT-2 y Mo-T (persistentemente infectadas con HTLV-I y HTLV-II respectivamente). Se realizó también la detección de secuencias provirales (genes tax, pol y LTR) por Nested-PCR “in house”. Se estudió un total de 181 muestras que habían sido testeadas por las técnicas de Aglutinación de Partículas de gelatina (Serodia Fujirebio, Tokio, Japan)  y  Enzimoinmunoensayo (Vironostika HTLV-1/2 Organon Teknika) y confirmadas por  WB (HTLV BLOT 2.4, Genelabs Diagnostics).  Se estudiaron en paralelo por IFI y nested-PCR 47 muestras indeterminadas por WB, 71 muestras positivas (66 HTLV-1 y 5 HTLV-2) y 63 muestras negativas para HTLV-I/II. El 29,8% (14/47) de las muestras indeterminadas fueron positivas por IFI, de estas el 43% (6/14) fueron positivas por PCR (4 HTLV-I y 2 HTLV-II). Por IFI fue posible  descartar la infección en el 70,2% (33/47) de las muestras indeterminadas por WB, siendo estas muestras concordantemente negativas por PCR. La IFI también fue positiva en los 6 casos positivos por PCR. Los resultados obtenidos corroboran que la IFI es una buena técnica complementaria  para el diagnóstico de HTLV-I/II, y que su incorporación en el algoritmo evitaría tener que realizar PCR y /o seguimiento a todas las muestras indeterminadas por WB que resulten negativas por IFI. Así, las muestras que resulten negativas por IFI indicarían ausencia de infección, mientras que las muestras indeterminadas por IFI (+) deberían ser corroboradas por PCR. De esta manera, se podrían optimizar los recursos y solucionar rápidamente el diagnóstico en perfiles indeterminados.