NUEVOS PÉPTIDOS HÍBRIDOS CON ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA FRENTE A GÉNEROS BACTERIANOS CAUSANTES DE DIARREAS EN NIÑOS DE SAN MIGUEL DE TUCUMÁN

NAVARRO, S.A; CHALON M.C.; MERLETTI, G; BARRIONUEVO, E; ASSA,J; BELLOMIO, A

Tafi Viejo , Tucuman

Jornada; II Jornadas de Microbiologia de Tematicas especificas del NOA; 2018

Asociación Argentina de Microbiología

Las diarreas bacterianas en niños son un problema de interés a nivel sanitario debido a que la mayoría de los casos están asociados a falencias en los sistemas de control de inocuidad de los alimentos y en las buenas prácticas de higiene. La bioconservación y el uso de bacteriocinas son una alternativa para sustituir productos químicos antimicrobianos utilizados para la conservación de alimentos. Las bacteriocinas son péptidos antimicrobianos de síntesis ribosomal que por lo general son activos contra bacterias relacionadas filogenéticamente a la bacteria que las produce.El estrecho espectro de acción representa una limitación importante para el uso de estos compuestos como conservantes de alimentos. En nuestro grupo de trabajo se realizó la fusión de los genes de enterocina CRL 35 y microcina V. Entre ambos péptidos se intercaló una región de bisagra de tres glicinas (Ent35-GGG-MccV) para posibilitar que, en la proteína resultante, cada péptido lleve a cabo su acción antimicrobiana independientemente del otro. Además, se obtuvieron dos mutantes (Ent35-GNG-MccV Ent35-GYG-MccV) mediante mutagénesis sitio dirigida de saturación.El presente trabajo tiene dos objetivos: en primer lugar, se realizó un análisis de la prevalencia de las cepas aisladas de muestras de materia fecal de niños con diarrea que se procesaron en el área de coprocultivo del Servicio de Microbiología del Hospital del Niño Jesús. Luego se evaluó la actividad antimicrobiana de la microcina V y de las bacteriocinas híbridas frente a los géneros bacterianos aislados con mayor frecuencia.Para llevar adelante este trabajo se recolectaron datos a través de las estadísticas del servicio, evaluando la prevalencia de cada género bacteriano desde el año 2014 a 2017. Para evaluar la actividad antimicrobiana de los péptidos una cantidad estandarizada de bacterias (0,5 McFarland) se esparció uniformemente sobre la superficie de una placa de agar de Müller-Hinton a fin obtener un césped bacteriano. A continuación, 10 µl de una solución de cada bacteriocina fueron puestos en placas. Las placas fueron incubadas durante 18-24 horas a 37°C. Después de la incubación se determinó la presencia de un halo de inhibición de crecimiento. Como resultado se observó que el principal genero bacteriano aislado fue Shigella (88 % de los casos positivos), en segundo lugar, el género Salmonella (8 % de los casos positivos) y en porcentajes menores Campylobacter, Vibrio y E. coli O157 H7. Además, se observó que dentro del género Shigella las especies más comúnmente aisladas son Shigella flexneri y Shigella sonneii.